唾液蛋白质N-聚糖分析方法优化及其在急性运动疲劳研究中的应用

【作者】 马卉； 张亮； 曹天成； 王松；

【机构】 武汉体育学院；

【摘要】 研究目的:运动疲劳是一种常见的非特异性症状,一直是运动科学领域研究的热点。在运动疲劳的研究领域中,唾液由于具有非侵入性、易于收集和可多次收集等优势,被认为是该领域具有潜力的研究目标之一。虽然约三分之一唾液蛋白质与血清蛋白质相同,但唾液蛋白质的含量低和成分复杂等特点阻碍了唾液样本的临床检测应用。本研究基于我们前期对人体血清蛋白质N-聚糖在急性运动疲劳前后变化的研究,拟分析唾液N-聚糖研究方法的可行性以及唾液N-聚糖在急性运动疲劳前后变化。研究方法:本研究招募了15名体育教育专业的大学生,通过功率自行车建立急性运动疲劳模型,并采集运动前后3min的唾液样本和血清样本。本研究利用蛋白质定量方法测定蛋白质浓度后,针对相对浓度较低的唾液蛋白质,使用三氯乙酸沉淀法沉淀唾液蛋白,为进一步的N-聚糖分析提供有效的浓缩途径。获得的唾液蛋白样本和血清样本,采用传统的肽N-糖苷酶F酶切法释放N-聚糖,并结合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱检测N-聚糖,建立有效的N-聚糖分析方法。基于上述的分析方案,对运动疲劳前后的唾液和血清的N-聚糖进行解析,探究唾液和血清中N-聚糖在运动疲劳前后的变化。研究结论:唾液蛋白质中鉴定到24种N-聚糖,其中有11种不同于血清中的N-聚糖。我们优化唾液样本的前处理方法,为唾液等低浓度样本分析提供有效的分析策略;该方法在动性疲劳的应用,为体育学、生物医学相关领域的研究分析提供新思路。更多还原