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鸡IL-2基因在大肠杆菌中的表达及可溶性单体的分离
【机构】 浙江大学动物预防医学研究所；
【摘要】 将去除信号肽的鸡白细胞介素2(IL-2)基因克隆到原核表达载体pET-28a (+),构建了重组表达质粒pET-28a (+)-chIL-2,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导,实现了重组鸡IL-2(rgoIL-2)蛋白在大肠杆菌中的表达。SDS-PAGE和Western-blotting分析显示,表达蛋白的分子量约为14.9 kD,能被抗鸡IL-2单克隆抗体和多克隆抗体特异识别。可溶性分析表明表达蛋白大部分以包涵体形式存在,部分以可溶形式存在,非变性电泳可见可溶性蛋白存在单体和多聚体组分。镍柱天然纯化的rchIL-2蛋白过滤后,利用?KTA FPLC(快速蛋白分离纯化系统)进行逐级分离,非变性电泳可见单一的鸡IL-2可溶性蛋白单体。这为进一步研究鸡IL-2的生物学功能及其临床应用奠定基础。
【基金】 浙江省重大科技攻关项目(No.2004C12036-01)
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会论文集
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会
- 【会议时间】2006-10-15
- 【会议地点】中国湖南长沙
- 【分类号】S852.61
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会禽病学分会