昆虫杆状病毒表达禽脑脊髓炎病毒VP1蛋白

【作者】 韦莉； 刘爵； 佘锐萍； 姚炜光； 周蛟； 王菁； 施蕾；

【机构】 中国农业大学； 北京市农林科学院畜牧兽医研究所； 首都师范大学；

【摘要】 根据AEVL2Z株全基因组序列,设计一对引物。利用RT-PCR技术,扩增AEV的外壳蛋白VP1基因。序列分析表明,VP1基因编码区为810bp,编码270个氨基酸残基。将VP1基因克隆到捐赠载体pFast-bacHTa,再将其转入含穿梭载体Bacmid的DH10Bac中。Bac与Bacmid发生位点特异性转座作用,得到VP1的重组穿梭载体Bacmid-VP1,再将其转染昆虫细胞Sf9。PCR鉴定证实VP1基因正确地插入到病毒基因组中,经过SDS-PAGE和Western blot检测,证实VP1基因在昆虫细胞中表达,大小约为35kD,VP1基因在Bac-to-Bac系统中的成功表达为禽脑脊髓炎病毒亚单位疫苗的研制和疫苗效果监测提供了技术条件。更多还原