新城疫病毒HN基因的遗传变异与HI相关性

【作者】 秦卓明； 王友令； 马宝臣； 欧阳文军； 贾强； 袁小远； 崔治中；

【机构】 山东农业科学院家禽研究所； 山东农业大学；

【摘要】 选取国内1999～2004年间分离的新城疫病毒株17株,经CEF蚀斑纯化和SPF鸡胚增殖,分别对其血凝素-神经氨酸酶(HN)蛋白和融合蛋白(F)进行基因克隆和测序,结合在GenBank中发表的LaSota、F48E9和Clone30等参考株序列,对其F和HN氨基酸和核苷酸序列进行同源性比较和遗传变异分析。结果表明:NDV分离株HN基因之间氨基酸高度同源,同源率为96.5%～99.8%,而与LaSota、F48E9和Clone30等传统疫苗株和强毒株的同源率仅为87.4%～89.9%;所有的国内野毒在538-540均缺少潜在的糖基化位点,而LaSota、Clone30、B1等疫苗株、F48E9和国外大多数NDV野毒均含有此位点,说明中国NDV分离株的遗传变异具有高度一致性,具有中国"地域"特点。F基因分型表明:17株NDV野毒中,12株为基因Ⅶ型,3株为基因Ⅱ型,2株为基因Ⅸ型。利用SPF鸡在隔离器中分别制备上述20株不同F基因型的NDV单因子阳性血清,进行血凝抑制(HI)交叉试验,计算NDV不同株之间的HI抗原同源性(r)。结果表明:LaSota与Clone30、F48E9之间HI抗原同源性分别为0.97和0.98,只有23.5%的NDV野毒与F48E9和La Sota间的同源性在0.9以上,而52.9%的NDV野毒与La Sota和F48E9的同源性已降至0.74～0.85,而且,即使同属于基因Ⅶ型的不同毒株间抗原的同源性也变化在0.79～1.0间。这表明NDV的抗原性已经发生了与La Sota明显可见的抗原性变异。利用统计学软件SPSS8.0对NDV不同株之间的HN氨基酸全长同源率、F基因氨基酸全长同源率、F基因前374个核甘酸的同源性与其HI抗原同源性(r)进行相关比较。结果表明:不同毒株的HN基因同源性与HI抗原同源性的相关指数(r=0.363)显著高于F基因同源性与HI抗原同源性的相关指数(r=0.16),更显著高于F基因前374bp的同源性与HI抗原同源性的相关指数(r=0.012)。这些结果又一次清楚地证明了,在对NDV保护性免疫中,对HN蛋白的抗体反应可能比对F蛋白的抗体反应更为重要,而与传统的F基因型无关。更多还原