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新城疫病毒F蛋白在昆虫细胞中的表达及其融细胞作用
【机构】 扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室;
【摘要】 用RT-PCR方法扩增出新城疫病毒标准强毒株F48E8的F基因,并将其克隆到pGEM-T载体,命名为pGEM-F。鉴定正确后,以BamHI和XbaⅠ双酶切将F基因从pGEM-F中释放出来,并插入到pFast BacⅠ载体中,得到重组转移载体pFast-NDF。然后将该重组质粒转入含有穿梭质粒的感受态DH10Bac中,通过转座作用获得重组穿梭质粒reBacmid-NDF。再用reBacmid-NDF转染Sf9昆虫细胞,获得含有新城疫病毒F48E8株F基因的重组杆状病毒。间接免疫荧光和Western-blot分析结果表明F蛋白在昆虫细胞中获得表达,而且主要表达于细胞膜上,并使感染重组杆状病毒的昆虫细胞在96小时发生融合作用。本文的研究结果为F蛋白的进一步开发奠定了基础。
【基金】 江苏省教育厅资助项目(JH03-028);全国优秀博士论文作者专项资金资助项目(200256)
- 【会议录名称】 中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会论文集
- 【会议名称】中国畜牧兽医学会禽病学分会第十三次学术研讨会
- 【会议时间】2006-10-15
- 【会议地点】中国湖南长沙
- 【分类号】S852.65
- 【主办单位】中国畜牧兽医学会禽病学分会