A/Swine/Hebei/1/2005(H3N2)分离株人工感染SPF鸡的致病性研究

【作者】 李玉平； 徐镔蕊；

【机构】 中国农业大学动物医学院；

【摘要】 猪流感（SI）是由猪流感病毒（SIV）引起的猪的一种急性、高度接触性呼吸道传染病。该病易引起继发感染,使死亡率显著增加,给养猪业带来巨大经济损失;另外,SIV可感染人,有时甚至是致死性的,给人类健康造成一定威胁。目前已发现高致病性H5N1禽流感病毒（AIV）可使人致病,导致死亡,且能在人群间引起局限性传播,鉴于猪可能是禽类和哺乳动物流感病毒中间宿主和发生基因重组的混合器,因此除了对AIV进行致病性研究外,对SIV进行致病性研究也是非常必要的。本试验研究了SIV对SPF鸡的致病性,所用毒株为本实验室分离、保存的分离株A/Swine/Hebei/1/2005（H3N2）。用不同稀释度的含毒尿囊液接种10日龄SPF鸡胚测定该毒株的鸡胚半数感染量(EID₅₀),每稀释度接种4枚胚;接种10只1日龄雏鸡测定该毒株的脑内接种致病指数（ICPI）;接种10只6周龄SPF鸡测定其静脉接种致病指数（IVPI）;取40只5周龄SPF鸡分三组,第一组8只鸡为致病性试验组,第二组25只鸡为定期取样观察组,于攻毒后2、4、6、8、10天随机剖杀五只鸡,采集肺、心、肝、脾、脑、肾、法氏囊、胰、十二指肠、盲肠扁桃体、胸腺做常规石蜡切片观察组织病变,再取肺脏研磨,接种SPF鸡胚进行病毒再分离,攻毒后每天采血测抗体变化情况,第三组7只鸡为对照组,一组和二组中每只鸡静脉接种0.2ml 10倍稀释尿囊液。结果为:EID₅₀、ICPI、IVPI分别为10-8.77/0.2ml,1.16/0.05ml,0.71/0.1ml。致病性试验结果为攻毒后第3天出现精神沉郁症状,试验结束时共死亡2只。剖检可见肺脏病变部呈暗红色,肝脏有少量出血点,个别鸡只法氏囊有出血点;光镜下观察到肺淤血,肺房内有红细胞,脱落的上皮细胞和纤维素样渗出液,三级支气管内有红细胞,单层扁平细胞脱落,肺呼吸毛细管腔隙变小甚至消失,血管周围水肿,组织结构疏松,间隙增宽;肾脏淤血、肾小管上皮细胞变性、坏死;肝细胞肿胀;法氏囊髓质淋巴细胞减少。从感染鸡肺脏中再次分离到病毒。HI试验结果为攻毒后第3天HI抗体效价为2⁵,随后持续升高,第7天达到2⁹,第10天效价为2¹⁰。参照AIV致病性判定标准,结合以上致病性指标,判定该毒株对SPF鸡呈低致病性。更多还原