H9N2亚型禽流感病毒复制特性的基因分析

【作者】 石火英； 陈素娟； 孙蕾； 刘秀梵；

【机构】 扬州大学兽医学院农业部畜禽传染病学重点开放实验室；

【摘要】 为研究A/Chicken/Guangdong/SS/94（H9N2）和A/Chicken/Shanghai/F/98（H9N2）复制特性差异的原因,从分子水平上探讨中国大陆1998年H9N2亚型禽流感病毒获得气溶胶传播特性的机制,本研究利用反向遗传技术,通过基因重排,产生来自A/Chicken/Guangdong/SS/94（H9N2）的两个表面基因和其余基因来自A/Chicken/Shanghai/F/98（H9N2）的三株重排H9N2亚型AIV。经动物实验发现,A/Chicken/Shanghai/F/98（H9N2）在气管和肺组织中的复制能力都很强,都是6.58±0.581og10EID50/0.2mL,而A/Chicken/Guangdong/SS/94（H9N2）在气管中的复制能力要强于在肺组织中的复制能力,分别是4.0±0.83 log10EID₅₀/0.2mL和2.5±0.33log10EID₅₀/0.2mL。2株病毒在肠道中的复制能力都不强,只是偶尔分离到病毒。A/Chicken/Shanghai/F/98（H9N2）在气管和肺中的复制能力明显要强于A/Chicken/Guangdong/SS/94（H9N2）,即1994年中国首次分离到的H9N2亚型AIV经过4年的宿主适应和基因进化,加强了其在呼吸系统的复制能力,奠定了气溶胶传播的基础。以A/Chicken/Shanghai/F/98（H9N2）为内部基因骨架,当替换为A/Chicken/Guangdong/SS/94（H9N2）的HA基因和/或NA基因时,病毒在鸡的气管中的复制能力都低于A/Chicken/Shanghai/F/98（H9N2）,其中RF/SSHA株与A/Chicken/Guangdong/SS/94（H9N2）的复制滴度最接近;RF/SSHA在肺组织中的复制滴度最低,RF/SSNA和RF/SSHA/SSNA在肺组织中的复制滴度要高于其表面基因的母本病毒株A/Chicken/Guangdong/SS/94（H9N2）,低于内部基因母本病毒株A/Chicken/Shanghai/F/98（H9N2）。表明HA和NA基因对H9N2亚型AIV在呼吸道的复制特性起主要作用,内部基因对H9N2亚型AIV在呼吸道的复制也有作用。有报道认为肠道是禽流感病毒复制的主要场所。而人适应流感病毒是在呼吸道复制,不在内脏复制。中国大陆自1994年家禽中流行H9N2亚型禽流感病毒,仅仅经过4年的进化,其在呼吸系统复制能力得到了明显的提高,值得人们重视。更多还原