LfMADS1对‘雷山一号’新铁炮百合的转化

【作者】 刘青； 李云华； 刘青林；

【机构】 中国农业大学观赏园艺与园林系；

【摘要】 为了获得无花粉、重瓣百合新种质,我们以‘雷山一号’新铁炮百合的小鳞片为受体,利用正交设计对预培养时间、菌液浓度、侵染时间和共培养时间4个因素的不同水平进行了筛选,建立了遗传转化体系,进行了百合花器官特性基因LfMADS1的转化,并对转基因植株进行了分子生物学检测。结果表明,‘雷山一号’小鳞片诱导不定芽发生的最佳培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.5 mg/L,诱导率为91.2%,分化系数7.18,分化力为6.54。小鳞片选择培养时抗生素Kan浓度为100mg/L,抑菌素为Carb 500mg/L。共培养时间是影响遗传转化的主要因子。‘雷山一号’小鳞片转化的最佳条件是预培养1天、侵染10min、共培养5天、菌液OD600值0.8;抗性芽的诱导率为2.67%,分化系数为1.75;最佳生根培养基为MS+IBA 1.0 mg·L^-1,生根率为1.33%。PCR检测的结果,得到4株转LfMADS1反义基因的‘雷山一号’基因株系,其中1株已通过PCR-Southern检测。本研究为培育无花粉重瓣百合奠定了一定的基础。更多还原