OxyR通过调控氧化应激反应和FliC与PilA促进西瓜噬酸菌的毒力

【作者】 王佳楠； 刘军； 赵玉强； 孙明晖； 于贵戌； 范加勤； 田艳丽； 胡白石；

【机构】 南京农业大学植物保护学院； 湖北省农业科学院植保土肥研究所； 江苏省中国科学院植物研究所；

【摘要】 由革兰氏阴性细菌西瓜噬酸菌（Acidovorax citrulli）引起的瓜类细菌性果斑病是威胁全球瓜类作物的一种毁灭性病害。在多种致病菌中,LysR型转录调控因子OxyR作为过氧化氢感受器和转录调控因子,可以感知活性氧的存在并诱导抗氧化系统,并调控细菌生物膜、运动性、毒力、鞭毛和菌毛等致病因子。然而,OxyR对西瓜噬酸菌致病性的影响尚未确定。本研究以西瓜噬酸菌xjl12为研究对象,qRT-PCR和Western blot结果显示,外源H₂O₂显著诱导了OxyR的转录和翻译表达。西瓜噬酸菌的oxyR缺失显著降低过氧化氢酶活性,以及对H₂O₂和抗生素利福平的耐受性。此外,OxyR通过调控鞭毛和Ⅳ型菌毛相关基因（fliC和pilA）的表达,导致ΔoxyR游动性完全丧失、蹭行运动显著减弱、生物膜形成能力基本丧失,从而显著降低西瓜噬酸菌的毒力和甜瓜体内定殖生长。qRT-PCR和Western blot以及细菌单杂交试验结果表明,OxyR直接结合pilA和fliC启动子正调控pilA和fliC的表达。细菌双杂交、GST pull-down和萤火素酶互补实验分别验证了OxyR可与PilA、FliC蛋白互作。综上所述,OxyR在西瓜噬酸菌中抗氧化应激反应和调节多种致病因子方面发挥着重要作用。更多还原