东方蜜蜂微孢子虫侵染过程中nce-miR-9769及其靶基因的表达谱

【作者】 荆欣； 郭睿； 陈大福；

【机构】 福建农林大学动物科学学院(蜂学学院)； 福建省蜂疗研究所；

【摘要】 本研究旨在对前期预测到的东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae nec-miR-9769进行表达和序列验证,并检测nce-miR-9769及其靶基因STPK在东方蜜蜂微孢子虫侵染意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂过程的相对表达量,为探究nce-miR-9769调控侵染的功能及作用机制提供基础。使用Stem-loop RT-PCR和Sanger测序对nce-miR-9769的表达和序列进行验证。通过相关生物信息学软件进行nce-miR-9769的靶基因预测和分析。采用RT-qPCR检测nce-miR-9769和STPK在东方蜜蜂微孢子虫侵染过程的相对表达量。nce-miR-9769在东方蜜蜂微孢子虫孢子中真实存在和表达。nce-miR-9769与STPK等28个靶基因之间形成1个调控网络。分别有28,14和18个靶基因可注释到Nr,Swissprot和KOG数据库;有16个靶基因可注释到代谢进程、细胞和结合等15个GO条目;有6个靶基因可注释到蛋白质加工、核糖核酸聚合酶和RNA转运等7条KEGG通路。相较于接种后1天(1 day post inoculation,1 dpi),nce-miR-9769在2 dpi的表达量极显著上调1.17倍,在4 dpi,6 dpi和8 dpi分别极显著下调30.19,1806.75和4567.40倍;STPK在2 dpi上调表达1.22倍,在4 dpi,6 dpi和8 dpi分别下调表达8.20,8.41和240.37倍。东方蜜蜂微孢子虫nce-miR-9769的真实存在和表达,nce-miR-9769及其靶基因STPK的表达量在东方蜜蜂微孢子虫侵染意大利蜜蜂工蜂的过程发生动态变化且nce-miR-9769与STPK之间具有相同的表达趋势。更多还原