基于海马BDNF/TrkB通路观察对药“香橼-佛手”抗抑郁作用

【作者】 宋美卿； 杨钤； 仲启明； 仝立国； 牛艳艳； 贾力莉； 冯玛莉；

【机构】 山西省中医药研究院；

【摘要】 目的探讨疏肝行气对药"香橼-佛手"对海马BDNF/TrkB信号通路的影响。方法用慢性不可预见性温和应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)配合孤养法随机应激持续21天建立大鼠抑郁模型,正常对照组群养且不给于任何刺激;采用酶联免疫法(Elisa)测定大鼠血清糖皮质激素(CORT)、脑源性神经营养因子(BDNF)的含量,免疫印迹法(Western blotting)检测大鼠海马BDNF蛋白的表达,采用实时荧光定量PCR(Real-Time PCR)检测大鼠海马酪氨酸激酶受体B (TrkB)的mRNA基因表达;用HE染色后光镜观察海马CA1、CA3、DG区神经元细胞结构形态的变化。结果空白组对照和"香橼-佛手"高剂量组大鼠血清CORT含量明显低于模型对照组(P<0.05),BDNF含量明显高于模型对照组(P<0.05)。HE染色空白对照组大鼠海马神经元细胞完整,结构正常,胞浆丰富,细胞核呈圆形、椭圆形,染色质在核内分布较均匀,核仁清晰,间质无水肿表现;模型对照组大鼠海马CA1区、CA3区均发现神经元细胞层数及数量减少,排列松散、大量神经元变性,体积变小,胞核与胞浆界限不清,核固缩成三角形或不规则形,而齿状回(DG)区变化不明显;"香橼-佛手"给药组神经元细胞损伤程度介于空白和模型对照组之间。海马CA1区GR蛋白免疫组化阳性细胞平均光密度值(Average Optical Density,AOD),模型对照组明显低于空白对照组(P<0.01),"香橼-佛手"高、中剂量组明显高于模型对照组(P<0.01,P<0.05)。各组海马BDNF蛋白半定量均明显多于模型组(P<0.05)。海马TrkBmRNA基因表达量模型对照组明显低于空白对照组(P<0.01),"香橼-佛手"高、中剂量组明显高于模型对照组(P<0.05,P<0.05)。结论 "香橼-佛手"有一定抗抑郁作用,可通过调控抑郁模型大鼠海马BDNF/TrkB信号通路发挥抗抑郁作用。更多还原