铅镉单独和联合染毒对大鼠BRL-3A肝细胞凋亡的影响

【作者】 薛俊姝； 殷中琼；

【机构】 四川农业大学动物医学院天然药物研究中心；

【摘要】 目的本试验研究铅镉单独和联合染毒对大鼠BRL-3A肝细胞凋亡的影响。方法通过建立铅镉单独和联合染毒大鼠BRL-3A肝细胞模型,经CCK-8法和DAPI法测定不同浓度的铅镉单独和联合染毒在不同时间对大鼠BRL-3A肝细胞活性和凋亡的影响;进一步探究铅镉单独和联合处理细胞12 h后,对细胞凋亡率、ROS、线粒体膜电位和线粒体凋亡途径相关蛋白Bcl-2、Bax、Cyt c、Cleaved caspase-3和Caspase-9表达水平的影响。结果 10μM、20μM和40μM醋酸铅、2.5μmol·L^-1、5μmol·L^-1和10μmol·L^-1氯化镉以及10+2.5、20+5、40+10μmol·L^-1醋酸铅和氯化镉联合处理大鼠BRL-3A肝细胞3、6、12 h后,与对照组相比,细胞活性呈现先升高后降低;处理12 h后,与对照组相比,铅镉单独和联合处理组显著抑制细胞活性,细胞凋亡率显著升高（P<0.05）,呈现剂量效应关系,铅镉联合处理组细胞活性显著低于铅镉单独处理组,其细胞凋亡率显著高于铅镉单独处理组,呈现联合毒性效应;与对照组相比,铅镉单独和联合处理组细胞ROS水平显著增加（P<0.05）,线粒体膜电位显著下降（P<0.05）,并呈现剂量效应关系,同时线粒体凋亡途径相关蛋白Bax、Cyt c、Cleaved caspase-3和Caspase-9表达水平显著升高（P<0.05）,Bcl-2表达水平显著降低（P<0.05）。结论铅镉单独和联合染毒,通过降低大鼠BRL-3A肝细胞活性,升高细胞内活性氧水平,降低线粒体膜电位水平,升高与线粒体凋亡相关蛋白的表达水平,最终通过线粒体途径诱导肝细胞凋亡。更多还原