BAPN调节宫颈癌细胞辐射敏感性的作用机制

【作者】 李铮； 刘竣天； 于迪； 焦文霖； 刘畅； 程云云； 申延男；

【机构】 吉林大学公共卫生学院国家卫健委放射生物学重点实验室；

【摘要】 BAPN是一种细胞赖氨酰氧化酶（LOX）的抑制剂。LOX是存在于细胞中的铜依赖性氨基酸氧化酶,它作用于细胞外基质胶原和弹性蛋白的赖氨酸残基,并使其产生分子交联。BAPN可以阻断LOX酶活性,影响其再合成和分泌释放,从而抑制LOX介导的肿瘤细胞侵袭能力。目的探究BAPN对宫颈癌细胞（Hela、SiHa）增强辐射敏感性作用及其机制,为宫颈癌放化疗联合治疗提供新的理论依据。材料与方法首先,采用CCK-8法检测在宫颈癌细胞中BAPN的IC₅₀,确定BAPN对2种宫颈癌细胞的增值抑制作用;采用qRT-PCR和Western blotting法检测BAPN对Hela和SiHa宫颈癌细胞中LOX mRNA和蛋白表达水平;采用克隆形成法检测BAPN对辐照前后Hela和SiHa宫颈癌细胞存活率的影响;采用γH2AX荧光斑点法检测BAPN对辐照前后Hela和SiHa宫颈癌细胞中DNA损伤修复水平;采用流式细胞术检测BAPN对辐照前后宫颈癌细胞凋亡水平的变化。结果 CCK-8实验结果显示,Hela和SiHa细胞对应的BAPN IC₅₀分别为30 nmol·L-1、45 nmol·L-1;qRT-PCR和Western blotting实验结果表明,处理BAPN后宫颈癌细胞中LOX mRNA和蛋白表达水平显著降低,并且呈剂量依赖性;克隆形成实验结果表明,相对于单纯照射组,BAPN处理组的辐照后宫颈癌细胞存活率明显下降;γH2AX检测结果显示BAPN处理组的辐照后细胞核内DNA双链断裂所产生的荧光斑点数量比单纯照射组细胞内荧光斑点数量增加;流式细胞术检测细胞凋亡结果显示,相比于单纯照射组,BAPN处理组的辐照后细胞凋亡明显增加。结论 BAPN可以促进宫颈癌细胞的辐射效应。因此,通过研究BAPN对宫颈癌细胞辐射敏感性的影响,为寻找新的肿瘤细胞辐射增敏剂提供新思路,为提高宫颈癌放射治疗效果提供新途径。更多还原