极低烟碱卷烟的体外毒理学评价

【作者】 王红娟； 李俊； 陈欢； 付亚宁； 侯宏卫； 胡清源；

【机构】 国家烟草质量监督检验中心；

【摘要】 目的吸烟是全球范围内的一个重要公共健康问题,与罹患多种疾病的风险增加有关。降低卷烟中的烟碱含量被认为是一种通过降低吸烟者依赖程度来减少吸烟对健康不利影响的策略。化学萃取是降低卷烟中烟碱含量的方法之一,本研究基于4种使用化学萃取法制备的不同烟碱含量的极低烟碱卷烟,对极低烟碱卷烟相对于常规卷烟的体外毒性风险进行评价。材料和方法 (1)经化学萃取法制备的4种极低烟碱卷烟和1种常规卷烟。常规卷烟烟碱含量为0.81 mg/cig,经化学萃取制备的4种极低烟碱卷烟的烟碱含量分别降至0.19,0.09,0.1,0.06 mg/cig。(2)0,20,40,60,80,100,120,140,160,180μg/mL的卷烟烟气冷凝物(CSC)处理人支气管上皮细胞系NCI-H292细胞24 h,CCK8法检测细胞存活率。(3)根据细胞存活率曲线,使用0,20,40,60,80μg/mL的CSC处理NCI-H292细胞24 h,采用EdU掺入法检测细胞增殖,JC-1探针检测线粒体膜电位变化,CellEvent Caspase3/7 Green荧光检测试剂(Thermo Fisher)检测Caspase3/7活性,Dihydroethidium荧光探针检测活性氧水平,免疫荧光检测DNA双链断裂标志物γH2AX水平。结果 (1)40～180μg/mL的CSC处理24 h剂量依赖性地诱导NCI-H292细胞存活率下降,4种极低烟碱卷烟CSC的半抑制浓度(IC50)分别为97.8±3.5,121.2±4.2,95.3±4.8,114.1±5.3μg/mL,常规卷烟CSC的IC50为130.3±7.1μg/mL,其中3种极低烟碱卷烟CSC的IC50值显著低于常规卷烟。极低烟碱卷烟CSC的IC50与其烟碱含量无关。(2)80μg/mL的剂量下,4种低烟碱卷烟CSC诱导的细胞增殖率下降程度、活性氧水平显著大于常规卷烟(P<0.05),3种低烟碱卷烟CSC诱导的γH2AX水平显著大于常规卷烟(P<0.05)。(3)在检测剂量范围内,所有卷烟CSC均剂量依赖性地引起线粒体膜电位下降,但4种极低烟碱卷烟CSC诱导线粒体膜电位下降程度与常规卷烟无显著差异(P>0.05)。(4)在检测剂量范围内,所有卷烟CSC均未显著诱导Caspase3/7活性上升(P>0.05)。结论经化学萃取法制备的极低烟碱卷烟可损伤人支气管上皮细胞,其毒性机制与细胞增殖抑制、线粒体损伤、氧化应激和DNA损伤有关。在相同暴露剂量下,极低烟碱卷烟产生的毒性大于常规卷烟。烟碱含量在0.06～0.19 mg/cig的范围内对极低烟碱卷烟的毒性不起决定作用。更多还原