lncRNA RUN12在胃癌中的表达及相关的机制研究

【作者】 黄志艺； 邹长棪； 林贤东；

【机构】 福州大学化学学院； 福建省肿瘤医院；

【摘要】 目的:探讨lncRNA RUN12基因表达与胃癌的进展的关系及相关的机制研究。方法:收集胃腺癌患者81例,分析RNU12表达与胃癌病理特征的关系。利用慢病毒载体构建过表达和敲低RNU12的胃癌AGS细胞系,并通过RT-qPCR、MTT法、划痕实验和transwell侵袭实验,检测RNU12在胃癌细胞中的生物学功能。通过lncRNASNP2等数据库预测RNU12可能结合的miRNA及下游作用的靶基因,并利用RIP、双荧光素酶实验进行验证。通过回复实验评估下游靶基因BLID与RNU12的关系。建立斑马鱼胃癌异种移植模型,探索RNU12与胃癌进展的关系。结果:RUN12在胃癌组织中低表达,而且其表达与病理特征密切相关。体外实验表明,RNU12过表达抑制胃癌细胞的侵袭性。RNU12和BLID的3’UTR都有hsa-miR-575结合位点,并且Hsa-miR-575是RNU12抑制剂和BLID阻滞剂。BLID在RNU12介导的胃癌细胞体外恶性行为起重要作用。斑马鱼胃癌移植模型研究表明,RNU12过表达抑制胃癌细胞的增值和转移。RIP、双荧光素酶实验及回复实验显示,RUN12通过miR-575/BLID信号轴调控胃癌的进展。同时,RNU12可以抑制多种促瘤因子的作用,如CCND1、PCNA、Cyclib D1、N-钙粘蛋白波形蛋白和BCL-2。结论:RNU12在胃癌中异常表达,且与临床病理特征密切相关。RUN12通过miR-575/BLID信号轴调控胃癌的进展。RUN12可能是胃癌潜在肿瘤分子标志物。更多还原