KAP1基因在人恶性胸膜间皮瘤(MPM)中表达的临床意义及对MPM细胞增殖和侵袭的影响

【作者】 王心萌； 周崇熙； 李彬； 自加吉； 普元倩； 邱璐； 梅雯； 张也频； 熊伟；

【机构】 大理大学基础医学院； 云南省高校临床生物化学检验重点实验室； 楚雄师范学院化学与生命科学系； 楚雄彝族自治州第一人民医院病理科；

【摘要】 目的:KRAB相关蛋白1 (KRAB-associated protein 1,KAP1)又称转录中介因子1β(transcriptional intermediary factor 1β,TIF1β),也称三结构域蛋白28 (tripartite motif-containing protein 28,TRIM28),是一种多功能的染色质解读器和转录中介因子,在诸多转录调控复合体中起桥梁作用。本研究旨在分析KAP1基因在人恶性胸膜间皮瘤(malignant pleural mesothelioma,MPM)细胞和组织中的表达,评价其与MPM患者预后的关系,并初步探讨KAP1基因在MPM中的作用机制。方法:采用RT-qPCR分析人正常胸膜间皮细胞系(LP9)和上皮样型MPM细胞系(NCI-H28)、肉瘤样型MPM细胞系(NCI-H2052)、双相混合型MPM细胞系(NCI-H2452)中KAP1基因m RNA表达量;采用RT-qPCR、Western blotting和免疫组化检测38例MPM组织及19例非MPM胸膜组织中KAP1基因表达水平。构建Kaplan-Meier模型探讨KAP1基因表达量对MPM患者预后的影响。通过siRNA技术沉默H2052细胞中KAP1基因表达,观察其对H2052细胞周期、细胞增殖、侵袭和细胞凋亡等恶性生物学行为的影响。结果:与非MPM胸膜细胞和组织相比,MPM细胞和组织中KAP1基因的表达量均呈现显著的增高(P<0.01)。KAP1基因表达量与MPM患者总生存率(OS)和无疾病进展生存率(DFS)均呈显著负相关(Logrank P<0.05)。KAP1作为转录激活因子,是G2/M转化和有丝分裂执行所必需的。siRNA敲低KAP1基因表达导致H2052细胞周期出现G2/M期阻滞,G2/M转换相关基因(AURKA、AURKB、BIRC5、INCENP、CDCA8、BMYB和FOXM1)表达水平显著下调(P<0.01),通过抑制H2052细胞有丝分裂进程,进而显著抑制细胞增殖和侵袭,导致细胞出现大量死亡。结论:KAP1基因在MPM细胞和组织中均呈现显著增高,且KAP1基因量与MPM患者的OS和DFS呈显著负相关。敲低KAP1基因导致MPM细胞出现G2/M期阻滞和G2/M基因表达下调,显著抑制MPM细胞增殖和侵袭,导致细胞死亡。更多还原