【作者】 薛美兰； 王贵发； 宋朋钊； 聂冲； 张子旭； 梁惠；

【机构】 青岛大学基础医学院； 青岛大学公共卫生学院；

【摘要】 目的:本研究旨在探讨岩藻多糖(Fucoidan)对人肝癌HepG2细胞酒精性损伤的保护作用及机制。方法:将HepG2细胞分为对照组、模型组(2.5%酒精)、低剂量岩藻多糖组(10μg/mL)、高剂量岩藻多糖组(20μg/mL)、雷帕霉素组(10 nM)、高剂量岩藻多糖(F2,20μg/mL)+氯喹(CQ)组(150μM),除对照组外,其他各组均加入溶度为2.5%的无水乙醇处理24 h,诱导细胞酒精性损伤,再采用MTT比色法、免疫荧光、ELISA法和Western blot等方法对相应指标进行检测,观察不同浓度岩藻多糖对酒精暴露HepG2细胞活性的影响,并探讨岩藻多糖体外改善细胞酒精性损伤的作用机制。结果:MTT结果显示,与酒精对照组相比,岩藻多糖干预可显著提高HepG2细胞的增殖活力,其中20μg/mL岩藻多糖干预12h、24h和48h后,与酒精组相比细胞存活率分别增加63%、38%和68%(P<0.001或P<0.0001)。岩藻多糖干预可显著降低转氨酶ALT和AST水平(P<0.01,P<0.001),与雷帕霉素处理组结果类似,而CQ处理后细胞的ALT和AST水平均显著升高(P<0.05或P<0.01)。岩藻多糖干预后降低了细胞上清中炎性因子TNF-α、IL-1β和IL-6水平(P<0.01)。免疫荧光结果表明,岩藻多糖干预后明显逆转了酒精诱导的LC-3B蛋白表达的下调。Western blot结果表明,与酒精组相比,岩藻多糖干预后明显上调Beclin 1的表达, LC3B II/LC3B I的比值也明显升高,而p62水平出现下调(P?0.05)。结论:岩藻多糖可通过调节自噬改善酒精暴露的HepG2细胞损伤。更多还原