组蛋白去甲基化酶PHF8调控E-cadherin表达促肝癌转移复发机制

【作者】 周武华； 周琳； 郑树森；

【机构】 浙江大学附属第一医院；

【摘要】 目的 :组蛋白去甲基化酶PHF8在人类恶性肿瘤中普遍高表达,且展现出促肿瘤转移复发的作用,但其与肝癌发生发展之间关系尚不明确,因此明确PHF8在肝癌中表达特征、潜在生物学作用及相应的分子机制具有重要的意义。方法 :首先,通过生物学信息方法分析PHF8在肝癌中表达特征,联合应用qRT-PCR、westernblot及免疫组化方法验证PHF8在肝癌中表达特征;其次,采用CCK8、小鼠荷瘤模型、Transwell、串联m Cherry-GFP-LC3融合蛋白方法探索PHF8潜在调控肝癌增殖、转移、细胞自噬等作用;最后,设计ChIP、补救实验及抑制剂实验阐述潜在的分子机制。结果 :生物数据库GEO及Oncomine分析结果显示PHF8表达水平在肝癌组织中显著升高(P<0.05),而qRT-PCR及免疫组化结果一步证实PHF8在肝癌组织中的表达水平较癌旁高(P<0.05),其中免疫组化结果显示PHF8表达升高的病例数为130/198例,临床病理参数相关性分析发现:PHF8高表达与肿瘤分期、分化程度、血管侵犯、肿瘤大小正相关,与肿瘤包膜完整性负相关(P值均<0.05),且PHF8高表达是肝癌复发及病死率的独立风险因子;功能实验显示:敲低PHF8表达能够促进肝癌细胞增殖、迁移侵袭及自噬过程,而过表达PHF8可增强上述过程;其中涉及分子机制为PHF8上调SNAI1、VIM及FIP200表达和下调E-cadherin表达;ChIP结果显示PHF8能够结合SNAI1、VIM及FIP200启动子区域发挥转录激活作用;补救实验及抑制试验结果表明PHF8下调E-cadherin表达途径有两条:通过上调SNAI1表达抑制E-cadherin转录和通过增强FIP200介导的细胞自噬促进E-cadherin蛋白降解。结论 :PHF8在肝癌中发挥癌基因作用,能够调控FIP200介导的细胞自噬降解E-cadherin,从而有助于肝癌细胞侵袭迁移;PHF8可望成为肝癌诊治的潜在分子靶点。更多还原