艰难梭菌培养联合酶法检测毒素蛋白(A/B)的临床应用价值探索

【作者】 吴晓燕； 冯雪君； 李胜兵； 宋国蓉； 倪侃翔；

【机构】 嘉兴市第二医院；

【摘要】 目的:通过对艰难梭菌培养及毒素检测的方法比较,建立艰难梭菌培养联合酶法检测毒素蛋白(A/B)的检测流程,评估其临床应用。方法:收集2015年-2017年住院腹泻患者粪便标本852份,采用显色培养法(ChromIDTM)培养粪便样本中的艰难梭菌,并对培养阳性菌株用VIDAS全自动免疫分析仪通过酶联免疫荧光法检测艰难梭菌毒素蛋白A/B (Clostridium difficile toxins A and B,CDAB)(艰难梭菌培养联合酶法);与粪便标本直接用VIDAS全自动免疫分析仪通过酶联免疫荧光法检测艰难梭菌毒素蛋白A/B (粪便直接酶法)及艰难梭菌培养阳性菌株用PCR方法检测其tcdA和(或)tcdB基因(艰难梭菌培养联合PCR法)进行比较,对艰难梭菌培养联合酶法检测艰难梭菌毒素蛋白A/B进行检出率、灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值的效能评价。结果:852例标本经显色培养共分离菌株108株,其中粪便酶法直接检测艰难梭菌A/B毒素蛋白检出率为5.99%(51/852);用培养阳性菌株联合酶法检测艰难梭菌A/B毒素蛋白检出率为10.92%(93/852);108株艰难菌梭菌培养阳性菌株联合PCR方法检测tcdA\tcdB基因,93株表达tcdA+tcdB+;6株表达tcdA-tcdB+;9株未表达,为tcdA-tcdB-;阳性菌株用酶法检测艰难菌素毒素蛋白A/B结果93株阳性,15株阴性,且93株阳性经PCR检测基因均表达tcdA+tcdB+;以PCR检测艰难梭菌毒素基因作为参考方法,培养阳性菌株联合酶法检测艰难梭菌毒素蛋白A/B、粪便酶法直接检测艰难梭菌毒素蛋白A/B的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值分别为93.94%、100%、100%、60%和51.52%、100%、100%、15.79%;一致性检验Kappa值分别为0.721和0.150。结论:显色培养后阳性菌株联合酶法检测艰难梭菌毒素蛋白A/B可以提高艰难梭菌检出率;该方法与PCR毒素基因检测有较好的一致性;操作简单;成本经济;对临床腹泻的诊断意义较大;具有较好的临床应用价值。更多还原