硝呋齐特对神经胶质瘤细胞自噬作用的影响

【作者】 蒋秋义； 杨光； 赵世光；

【机构】 哈尔滨医科大学附属第一医院； 深圳大学总医院；

【摘要】 目的:NFX一直被用于治疗细菌感染和相关腹泻,直到发现它对STAT3的抑制作用,NFX迎来了该药历史上的转折点,为其应用于癌症靶向治疗或某些炎症性疾病提供了新的视角。本研究基于药物再利用开发策略的考虑,旨在探讨NFX对胶质瘤细胞自噬作用的影响,以推动抗胶质瘤化疗药物的研发进程。方法:我们首先利用MTT实验检测了NFX在不同药物浓度和作用时间下对胶质瘤细胞系LN229细胞增殖活性的影响。随后在透射电镜下观察到了细胞自噬的发生,并使用Westernblot实验确定了NFX对自噬标志蛋白的调控。为了进一步证实肿瘤细胞内LC3-II表达水平的变化是由于NFX激活自噬引起的,我们加入了自噬抑制剂氯喹(Chloroquine,CQ)和自噬激活剂(Torin)进行了MTT实验。最后,通过Western blot实验检测了胶质瘤细胞被不同浓度的NFX处理后AMPK/mTOR通路相关蛋白的表达情况。结果:我们的表型实验结果表明NFX具有抗肿瘤作用。MTT实验结果显示NFX能够以时间和浓度依赖性的方式抑制胶质瘤细胞的活性。我们在透射电镜下观察到NFX可以促进胶质瘤细胞产生自噬小体。同时随着NFX药物浓度的增加和作用时间的延长,自噬关键蛋白LC3-II的表达水平明显递增。与CQ相比,Torin和NFX的联合作用对细胞自噬的影响更明显。随着药物浓度的增加,p-AMPK蛋白的表达水平出现递增趋势,p-mTOR蛋白的表达水平下调,自噬反应关键蛋白Atg12表达上调。结论:NFX可能通过AMPK/mTOR信号通路激活了胶质瘤细胞的自噬,被作为一种有生物学前景的抗胶质瘤药物以实现药物再利用的设想。更多还原