DBA/1小鼠胸腺来源的iNKT细胞的增殖和定向分化

【作者】 陈冬志； 李钊； 梁蕊； 刘慧芳； 王园园； 史鸿云； 孟明；

【机构】 河北大学基础医学院； 河北省炎性自身免疫性疾病发病机制及防治重点实验室； 河北大学附属医院；

【摘要】 目的:iNKT细胞在体内的含量极低,直接从体内获得的细胞数量很难充分发挥其临床应用的潜力。通过体内刺激和体外定向诱导,激活和扩增小鼠胸腺中的iNKT细胞,旨在获得大量具有特定功能的iNKT细胞。方法:给予DBA/1小鼠不同方式注射α半乳糖神经酰胺(α-GalCer),分离并体外培养胸腺单个核细胞。采用流式细胞仪检测不同α-GalCer注射方式对小鼠胸腺iNKT细胞及亚群的影响,和体外培养后iNKT细胞及其亚群的改变,以及培养上清中细胞因子的变化。结果:与多次皮下注射组相比,α-GalCer单次皮下注射组iNKT细胞频率在α-GalCer刺激后4、6、8、10、12天均显著增加,其中iNKT1细胞亚群在第4天最高,而iNKT2细胞亚群在第8天达到高峰。α-GalCer单次皮下注射8天后胸腺单个核细胞体外培养14天组iNKT细胞频率显著高于其他各组,且iNKT1亚群频率达到峰值。培养上清中IFN-γ的含量与iNKT1细胞水平一致,表明体外诱导的iNKT细胞与体内的自然iNKT细胞在功能上无明显差异。结论:本实验通过体内α-GalCer刺激和体外诱导扩增相结合的方法,从小鼠胸腺中获得了高水平的具有特定功能的iNKT细胞,为体外大规模获取iNKT细胞提供了非常重要的研究思路和方法,也为iNKT细胞过继免疫治疗相关疾病提供了可能。更多还原