猪源促血小板碱性蛋白基因PPBPSYBR greenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

【作者】 王飞飞； 刘珂； 马志永； Yong SamJung； 钱莺娟；

【机构】 上海兽医研究所； 南京农业大学；

【摘要】 <正>引言猪促血小板碱性蛋白是由PPBP基因编码的蛋白,PPBP又名CXCL7-细胞因子7,属于细胞因子ELR CXCL家族的一员。通过酶切作用,CXCL7会出现不同的分型,包括PBP,CATPⅢ,NAP2~1。实时荧光定量PCR是一种更加敏感的PCR检测方法,在常规PCR方法中,在扩增反应结束之后,一般通过凝胶电泳的方法对扩增结果做定性分析,无法对PCR扩增反应进行实时检测。1993年日本guchi~2首次采用动态和封闭式检测方法对目的核酸数量进行定量分析,这是首次提出实时荧光定量技术概念,1995年美国PE公司研制Taqman技术,1996年推出第一台荧光定量PCR检测系统。今年来,荧光定量PCR技术不断完善,得到快速发展。并且它具有操作简单,快速方便,灵敏度高,重复性好等优点,更多还原