植酸酶多抗的制备

【作者】 胡骁飞； 魏凤仙；

【机构】 河南农科院动物免疫学重点实验室； 河南农科院畜牧兽医研究所；

【摘要】 <正>引言/目的植酸酶是饲料中常用酶制剂^[1]。目前,其检测方法比较复杂,不利于推广普及^[2]。本研究目的是制备植酸酶多克隆抗体,为建立植酸酶灵敏快捷免疫学检测方法奠定基础。材料方法麸皮植酸酶标准品溶解于磷酸盐缓冲液（PBS）充分振荡,6000r/min分钟离心20分钟,收集上清溶液;SDS-PAGE凝胶电泳法鉴定蛋白纯度,考马斯亮蓝法测定总蛋白浓度。按50μg蛋白/只/次免疫BALB/C雌性小鼠,首免用植酸酶液与等量弗氏完全佐剂混合,25000r/min乳化5min;4周后加强免疫,植酸酶液与等量弗氏不完全佐剂混合、乳化,强化免疫3次,每次间隔4周;四免60d摘眼球取血,4℃放置过夜,5000r/min离心15分钟,取上清。间接ELISA方法测效价,阻断ELISA测敏感性和特异性。更多还原