LAM/ITGα6β1/FAK信号通路在大鼠腮腺萎缩、再生中的表达及作用机制初步研究

【作者】 于成龙； 左金华；

【机构】 滨州医学院附属医院口腔颌面外科滨州医学院临床实验中心滨州医学院肿瘤研究实验室；

【摘要】 背景:放疗、结石、舍格伦综合征等原因可导致唾液腺萎缩,唾液分泌减少,严重降低患者生活质量。目前治疗方法大都是补充人工唾液等姑息疗法,却没有一种根本有效的方法逆转腺体的损伤。研究发现,导管再通后,萎缩的腮腺组织可恢复正常形态与功能,但其机制未明,因此,有关信号通路的研究势在必行。目的:观察层粘连蛋白(LAM)、整合素α6β1(ITGα6β1)、黏着斑激酶(FAK)在大鼠腮腺组织萎缩、再生过程中的表达变化,初步探索唾液腺萎缩和再生的信号通路机制,为临床上实现腺体的自我修复与再生提供理论基础。材料与方法:1.78只Wistar雌性大鼠随机分为实验组(72只)和对照组(6只)。实验组构建右侧腮腺主导管结扎、再通诱导的腮腺组织萎缩、再生大鼠模型。于结扎后1、3、5、7天,以及结扎7天后再通1、3、5、7、10、14、21、28天获取新鲜大鼠腮腺组织。2. HE染色观察腮腺组织形态学改变,AB-PAS染色分析腮腺组织分泌功能变化。3.免疫组织化学染色观察LAM、ITGα6β1、FAK在组织中分布特征。4.Western Blot、实时荧光定量PCR检测LAM、ITGα6β1、FAK在腮腺萎缩、再生过程中蛋白及m RNA水平的表达量变化。结果:1.导管结扎7d腮腺组织萎缩显著,再通28d恢复正常组织形态与分泌功能。2.正常组织中LAM呈线性围绕在腺泡细胞基底膜表面,ITGα6β1在腺泡细胞以及导管细胞基底膜上均强烈表达,FAK均匀且弥漫性定位在腺泡细胞胞浆中;导管结扎后LAM、ITGα6β1在腺泡细胞基底膜的染色中断,导管再通后逐渐恢复其连续性。3. LAM与其受体ITGα6β1表达量变化基本一致,表现为导管结扎后先降低后升高;导管再通后前3d表达量减少,而后逐渐上升到14d到达峰值后下调。FAK表达量在腮腺细胞凋亡过程中持续减少,在再生过程中保持升高趋势。差异有显著性,P<0.05。结论:1.受损的腮腺组织仍具备自我修复与再生的能力。2.LAM/ITGα6β1/FAK通路能够感知并传递机械力信号,参与调控导管结扎、再通诱导的腮腺组织萎缩与再生。3.可能的机制是:机械力刺激引发LAM/ITGα6β1信号缺失,启动凋亡程序。随后持续的高压诱导LAM//ITGα6β1反应性上调,蓄积再生潜能。压力释放初期,LAM/ITGα6β1表达反应性降低,压力进一步释放,LAM上调,并激活其受体ITGα6β1。FAK作为胞内信号传导中枢,可能受包括LAM/ITGα6β1在内的多条上游通路调控,进而介导腮腺细胞凋亡与再生。而更确切的机制有待进一步研究论证。更多还原