iRoot BP Plus对根尖牙乳头干细胞生物学性能的影响

【作者】 杨宁； 韩雪； 刘尧；

【机构】 中国医科大学口腔医学院·附属口腔医院儿童口腔科辽宁省口腔疾病重点实验室；

【摘要】 目的:再生性牙髓治疗(RET)是年轻恒牙牙髓及根尖周疾病治疗的新策略。在RET中,理想的冠方封闭材料应具有募集干细胞,诱导牙髓-牙本质样复合体形成以及良好封闭性等性能,在很大程度上决定RET疗效。iRoot BP Plus是一种具有良好生物相容性的新型生物陶瓷材料,其在RET中应用前景有待研究。根尖牙乳头干细胞(SCAP)是参与RET根管内再生组织形成、促进牙根继续发育及根尖孔闭合的重要干细胞源。本课题旨在研究iRoot BP Plus对SCAP细胞毒性、增殖、迁移和成骨/成牙本质向分化等生物学性能的影响,为将iRoot BP Plus作为冠方封闭材料应用于RET提供理论依据和实验基础。材料与方法:采用酶消化法原代分离培养人SCAP并进行细胞鉴定。制备iRootBPPlus浸提液配制条件培养液并处理SCAP,以MTA条件培养液作为对照组,以正常培养液为阴性对照组。四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测SCAP增殖率;划痕修复实验观察SCAP迁移能力;iRoot BP Plus条件培养基处理SCAP3天后体外成骨诱导培养,RT-PCR检测SCAP成骨相关基因ALP、RunX2的m RNA表达水平,茜素红染色观察SCAP矿化结节形成情况。结果:1.细胞增殖实验结果显示:与正常培养SCAP相比,iRootBPPlus和MTA组在3、5d时SCAP增殖率均下降,且两者之间无明显差异(P> 0.05);iRootBPPlus和MTA组SCAP增值率分别界于90.64%-106.75%和93.82%-101.37%,依据ISO10993-5标准,两种材料均无细胞毒性。2.细胞迁移实验结果显示:iRoot BP Plus和MTA组SCAP迁移能力均高于正常培养组;与MTA组相比,iRoot BP Plus组促进SCAP迁移作用更显著(P <0.01)。3.体外成骨诱导实验结果显示:与正常培养SCAP相比,iRoot BP Plus和MTA组SCAP中ALP、RunX2 mRNA表达水平均上调,且iRoot BP Plus组SCAP中ALP和RunX2m RNA表达水平明显高于MTA组;与正常培养SCAP相比,iRootBPPlus和MTA组SCAP矿化结节形成量均明显增多,以iRoot BP Plus组更为显著(P<0.01)。结论:iRoot BP Plus对SCAP无细胞毒性作用;与MTA相比,iRoot BP Plus具有更强的促进SCAP细胞迁移和成骨/成牙本质向分化作用。iRoot BP Plus可以作为冠方封闭材料的新选择应用于年轻恒牙再生性牙髓治疗。更多还原