巨噬细胞来源的外泌体不同提取方法的比较

【作者】 王飘飘； 王会会； 彭代银； 张善堂； 陈卫东；

【机构】 安徽中医药大学； 安徽省中药研究与开发重点实验室； 安徽省立医院药剂科；

【摘要】 目的:根据聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)沉淀原理结合超高速离心改进一种简便快速的细胞外泌体分离方法。方法:本实验采用超高速离心法、PEG6000沉淀结合超高速离心和EXO Quick试剂盒分别提取巨噬细胞外泌体。通过透射电镜、NanoSight ZS及Nanoparticle tracker (NTA)分析外泌体的形态和粒径。蛋白印迹法鉴定细胞外泌体标志物Alix、TSG101的表达情况。结果:本实验PEG6000沉淀结合超高速离心法获得的外泌体其粒径分布和差速离心法相当,小于商品化的EXO Quick试剂盒。而外泌体表面蛋白Alix、TSG101在三种方法提取的沉淀物中都有表达。透射电镜结果显示三种方法均得到了典型的盘状囊泡。结论:本实验改进的细胞外泌体提取方法,操作简洁、效率高并且成本较低。更多还原