Tn1721转座子介导bla_CTX-M-27在动物源大肠杆菌与沙门菌间的传播

【作者】 赵秋云； 李湾； 蔡润茂； 蒋红霞；

【机构】 华南农业大学兽医学院；

【摘要】 [目的]本文的目的是研究bla_CTX-M-27基因在食品动物源大肠杆菌质粒与沙门菌P1-like噬菌体间的传播机制。[方法]采用PCR法对本实验室2003～2014年间,从广东、山东、广西、河南采集的食品动物源样本筛选bla_CTX-M-27阳性大肠杆菌和沙门菌。琼脂稀释法测定bla_CTX-M-27阳性菌对17种抗菌药物敏感性。PCR法检测P1-like噬菌体标志基因repL。采用接合转移/转化、复制子分型、S1-PFGE和Southern杂交等对bla_CTX-M-27的水平传播和质粒特征进行分析。Illumina二代测序分析bla_CTX-M-27基因环境。通过bla_CTX-M-27阳性菌株生长曲线和其质粒的稳定性检测细菌适应性。[结果]共筛选出bla_CTX-M-27阳性大肠杆菌18株（2.05%,18/867）、阳性沙门菌33株（11.96%,33/276）。药敏结果显示:51株bla_CTX-M-27阳性菌株对氨苄西林、头孢噻肟、氟苯尼考和卡那霉素耐药率最高（100%）,其次为恩诺沙星和四环素（98.2%）、氯霉素、头孢曲松和阿米卡星（>90%）。repL基因检测结果显示,33株（100%）沙门菌均携带P1-like噬菌体,而18株大肠杆菌中均未检出repL。18株大肠杆菌携带的质粒复制子类型分别为IncFⅡ（66.67%,12/18）、IncN（22.22%,4/18）,其中有2株不可分型（11.11%,2/18）。Southern杂交表明33株沙门菌中bla_CTX-M-27与repL基因均定位于约100kb大小P1-like噬菌体。质粒IncFⅡ,IncN与沙门菌P1-like噬菌体bla_CTX-M-27基因环境相同,均为Tn1721转座子(ΔISEcp1B-bla_CTX-M-27-IS903D-iroN-Tn1721)。另外,41.18%（21/51）的接合子和转化子中bla_CTX-M-27与ESBLs或PMQR基因共存。细菌适应性结果表明:P1-like噬菌体较IncFⅡ,IncN质粒更稳定,携带P1-like噬菌体转化子生长迟缓且平台期细菌浓度低于其他受试菌。[结论]本研究发现Tn1721转座子介导了bla_CTX-M-27在食品动物源大肠杆菌和沙门菌间的传播以及质粒和噬菌体的水平传播加速了bla_CTX-M-27的流行,为深入研究耐药基因在不同细菌间的传播机制提供依据。更多还原