养殖场大肠杆菌bla_CTX-M-27传播机制研究

【作者】 张岩； 赵秋云； 林晓玲； 孙银焕； 蒋红霞；

【机构】 华南农业大学兽医学院；

【摘要】 [目的]bla_CTX-M-27基因在食品动物沙门菌的检出率高于大肠杆菌,且主要以P1噬菌体介导传播扩散,而bla_CTX-M-27在动物源大肠杆菌中的传播特征至今尚不清楚。本研究探讨了养殖场动物源大肠杆菌中bla_CTX-M-27基因的传播机制。[方法]采用PCR测序方法从养殖场分离的大肠杆菌中筛选bla_CTX-M-27阳性菌,采用PFGE分析菌株的亲缘关系,采用接合转移、复制子分型、S1-PFGE、Southem-blot杂交以及质粒的Illumina Hiseq测序对携带bla_CTX-M-27基因的质粒的传播特征进行分析并测定了携带bla_CTX-M-27质粒的稳定性。[结果]共分离得到58株bla_CTX-M-27阳性大肠杆菌,有8株（13.79%）同时携带bla_CTX-M-1G耐药基因,28株（46.55%）携带floR,11株（18.97%）携带mcr-1。有20株（34.48%）、11株（18.97%）、1株（1.72%）携带oqxAB、qnrS、aac（6’）-Ib-cr。PFGE结果显示bla_CTX-M-27基因以水平传播为主。58株bla_CTX-M-27阳性菌中有38株菌的bla_CTX-M-27基因成功发生接合转移,其质粒复制子类型主要为FIB型,bla_CTX-M-27基因位于5种大小不同的质粒上。FIB型质粒中bla_CTX-M-27上游为ISEcp1序列,ISEcp1距离bla_CTX-M-27片段250bp,但被IS26截断,IS26上游为被IS1B截断的Tn3片段,下游检测到IS903B,属于IS1B-ΔTn3-IS26-ΔISEcp1-bla_CTX-M-27-IS903B转移结构,IS903B下游结构分别为aadA5,qacEΔ1,sul1基因,未发现intI1结构。质粒的稳定性测定发现无抗生素压力下FIB型质粒能稳定存在。[结论]bla_CTX-M-27阳性大肠杆菌表现多药耐药现象,同时携带多个耐药基因;IS1B-ΔTn3-IS26-ΔISEcp1-bla_CTX-M-27-IS903B转移单元介导了bla_CTX-M-27在动物源大肠杆菌中的水平传播。更多还原