牛结核病PCR检测试剂盒的研制

【作者】 吴位珩； 徐景峨； 孙启跃； 杨莉； 史开志； 文才智； 杨茂生；

【机构】 贵州省畜牧兽医研究所； 贵州省农科院科研处；

【摘要】 根据GenBank中的牛结核分枝杆菌IS6110的基因片段,设计了1对引物,通过对PCR反应条件进行优化,研制了用于检测牛结核病的PCR试剂盒,该试剂盒扩增的阳性条带为478 bp,敏感性结果显示,该PCR检测试剂盒的最低核酸检测量为3.04pg?μL,特异性试验表明,仅结核分枝杆菌扩增结果为阳性,副结核分枝杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、大肠杆菌、巴氏杆菌、沙门氏菌、金葡萄球菌、链球菌的扩增结果均为阴性。﹣2O℃至少可保存12个月,且重复性良好。应用该PCR试剂盒对39份临床样本进行了检测,其PCR检测结果与结核菌素试验检测结果相一致。结果表明,牛结核病PCR检测试剂盒能够对牛结核临床样本进行快捷、灵敏、准确的检测。更多还原