TRPV1的敲除缓解由LPS引起的小胶质细胞激活以及小鼠抑郁样行为

【作者】 宋锐； 游自立；

【机构】 电子科技大学生物信息中心；

【摘要】 重度抑郁症(MDD)是一个以持续的心情低落为临床特征的疾病。尽管现在对重度抑郁症的研究已经取得较大进展,但是抑郁症产生及其发展的具体机制现在仍不清楚。目前一些研究已经报道小胶质细胞在抑郁症的病理发生过程中扮演重要角色,小胶质细胞通过分泌大量促炎性细胞因子,引发中枢炎症,进而引起小鼠抑郁样行为。在本文中,我们提出瞬时受体通道香草酸亚型1 (TRPV1)参与到小胶质细胞激活以及其促炎性因子的释放过程。通过给野生型鼠(WT)和TRPV1敲除型鼠(TRPV1 KO)腹腔注射LPS引起抑郁样行为来探究TRPV1在其中所发挥的作用,我们发现TRPV1敲除型鼠在强迫游泳和悬尾试验中均表现出更少的不动时间。进一步地,我们检测TRPV1敲除型鼠海马区小胶质细胞IL-6、TNF-α的表达情况,发现这些促炎性细胞因子均表达显著减少,这揭示说小胶质细胞的激活状态有一个缓解。而IL-1β作为促进中枢炎症以及抑郁症发生的主要细胞因子,其表达也有一个显著降低。与之一致的是,在体外实验中,与野生型相比,TRPV1敲除的小胶质细胞对于LPS刺激引起的IL-1β的释放以及小胶质细胞的激活状态也有一个显著地减少和缓解。因此,通过靶定TRPV1,可以作为一个中枢炎症引起抑郁症的潜在治疗方案。目的:我们研究的主要目的是探究是否TRPV1能够调节小胶质细胞的激活状态、神经炎症的剧烈程度以及小鼠的抑郁样行为。方法:在野生型小鼠腹腔注射LPS后检测其抑郁样行为、海马区炎症因子,并比较筛选出炎症水平最高的时间点。分别在野生型鼠与TRPV1敲除型鼠腹腔注射LPS后检测检测海马区炎症水平及小胶质细胞的激活状态,检测IL-1β、IL-6以及TNF-α表达量;在野生型鼠腹腔注射LPS前,通过侧脑室注射TRPV1拮抗剂或激动剂干预TRPV1功能,检测上述指标;体外培养TRPV1敲除与野生型鼠的原代小胶质细胞,依次给予TRPV1激动剂,LPS刺激,检测炎症因子mRNA水平的表达,Western Blot检测IL-1β表达量。结果:通过比较LPS注射之后的野生型鼠和TRPV1敲除型鼠,我们发现在强迫游泳和悬尾试验中,TRPV1敲除型鼠表现出的绝望行为是显著弱于野生型鼠,同时在促炎性因子的表达量、小胶质细胞的激活状态上,也是显著弱于野生型鼠。结论:TRPV1的敲除,可以显著缓解由LPS引起的小胶质细胞激活、中枢炎症的发生以及小鼠的抑郁样行为。更多还原