电刺激模拟运动对线粒体外膜蛋白MARCH5表达的影响

【作者】 肖红； 于亮； 高扬； 付悦；

【机构】 北京体育大学；

【摘要】 研究目的:线粒体自噬主要由泛素介导或由自噬受体介导,MRACH5通过泛素介导的途径参与低氧应激诱导的线粒体自噬调节。而MARCH5在运动诱导线粒体自噬中的生物学功能尚未确定。本研究试图探究运动激活线粒体自噬时的作用过程是否由MARCH5介导,研究结果将为完善应激诱导线粒体自噬的机制提供部分证据。研究方法:C2C12小鼠成肌细胞分成四组,分别为对照组(C)、运动组(E)、药物组(I)、运动+药物组(EI)。四组细胞分别给予对照无干预、运动干预(电刺激分化肌管细胞,以此模拟骨骼肌和收缩运动,电刺激参数为15v,1Hz,2ms,60min)、药物干预(50μM氯喹处理细胞60min)、电刺激联合药物干预将上述两者结合。BCA法提取线粒体蛋白,WB法检测线粒体蛋白表达,数据统计使用单因素方差分析。研究结果:与对照组相比:E组p62蛋白表达水平显著降低(p<0.05),I组p62表达水平升高(p<0.05),EI组p62蛋白表达水平显著升高(p<0.05);E组LC3 II/I表达水平升高,I组LC3 II/I表达水平降低(p<0.05),EI组LC3 II/I表达降低(p<0.05);E组MARCH5表达水平降低,I组MARCH5表达水平升高,EI组表达水平降低。研究结论:(1)电刺激诱导细胞线粒体自噬,p62表达量减少,LC3 II/I表达水平上升;(2)线粒体自噬可能引起MARCH5降解或促进其消耗;氯喹可以促进常态细胞线粒体MARCH5表达,也可以促进线粒体自噬MARCH5时的表达;(3)MARCH5减少线粒体自噬程度增加,MARCH5堆积可能使线粒体自噬减弱,机制未明,且MARCH5在不同细胞中作用可能并不相同,需进一步研究。更多还原