RhoC shRNA对多发性骨髓瘤血管内皮细胞参与血管生成的影响

【作者】 刘凯； 王瞳； 邱森； 田翔宇； 韩俊雅； 韦娜； 赵志华； 陈奎生；

【机构】 郑州大学第一附属医院病理科河南省肿瘤病理重点实验室；

【摘要】 目的探讨下调RhoC表达体外对骨髓瘤血管内皮细胞伪足形成、迁移能力、成管出芽能力及体内血管生成能力的影响。方法构建RhoC shRNA慢病毒载体下调血管内皮细胞中RhoC表达,采用qRT-PCR技术检测RhoC mRNA表达情况;激光共聚焦显微镜观察伪足数目变化;二维基质胶和三维微载体球培养内皮细胞分别观察成管和出芽数目;在显微镜下观察裸鼠体内基质胶中血管生成情况;Western blot分别检测RhoC蛋白、MAPK蛋白、ROCK蛋白表达情况。结果 RhoC shRNA慢病毒载体有效下调了细胞中RhoC mRNA表达;下调血管内皮细胞中RhoC表达,细胞伪足数目明显减少、二维管状结构和出芽数目均分别减少;随着RhoC蛋白表达降低,MAPK蛋白、ROCK蛋白表达量均降低;下调骨髓瘤细胞RPMI8226中RhoC表达,体内基质胶中血管数目也明显降低。结论下调RhoC表达可以抑制骨髓瘤血管内皮细胞参与血管生成,其机制可能与RhoC/MAPK信号通路、RhoC/ROCK信号通路有关。更多还原