miR-27b-3p通过靶向MSTN调控鸡成肌细胞的增殖

【作者】 何明亮； 吴鹏飞； 陈福祥； 张欣超； 谢恺舟； 王金玉； 张跟喜；

【机构】 扬州大学；

【摘要】 MicroRNA(miRNA)是一类内源性的长度约为21-23个核苷酸的非编码的单链小分子RNA,它具有广泛的生物学功能。许多研究都表明mi RNA在鸡胚的生长发育中发挥着重要作用,包括在骨骼肌发生、成肌细胞的增殖分化和凋亡、细胞的迁移等众多生命活动起重要调控作用,同时其对于肉鸡的生长发育也有重要的调控作用。本课题组前期的研究表明miR-27b-3p在调节鸡成肌细胞的增殖和分化中可能发挥着重要作用,然而,miR-27b-3p调控鸡成肌细胞增殖和分化的机制仍不清楚。在本研究中,通过q RT-PCR检测京海黄鸡12胚龄到1日龄鸡的胸肌和腿肌中miR-27b-3p的表达量,发现在12胚龄到1日龄鸡的胸肌和腿肌中miR-27b-3p的表达持续上调,预测的靶基因MSTN在12胚龄到18胚龄的胸腿肌中持续上调,在18胚龄到1日龄中持续下调,并通过双荧光素酶报告基因系统验证了MSTN基因是其靶标基因,miR-27b-5p能够靶向抑制MSTN基因的表达。此外,对鸡成肌细胞进行miR-27b-3p的过表达和干扰并对其进行CCK-8、流式细胞术和qRT-PCR检测,发现过表达mi R-27b-3p可显著促进鸡成肌细胞的增殖,干扰miR-27b-3p可显著抑制鸡成肌细胞的增殖。该研究为进一步了解miR-27b-3p在鸡中的功能并揭示其对肌肉生长的作用机理提供了理论基础。更多还原