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基因TCTP与溴氰菊酯应激及其抗性关系的研究

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【作者】 英晓莉刘雅慧陈露程罗根

【机构】 南京师范大学

【摘要】 翻译控制肿瘤蛋白(translationlly controlled tumor protein,TCTP)是一种广泛存在于动植物体内,序列上高度保守且高度表达的蛋白,具有多种生物功能,包括调节细胞周期的进程和恶性转移、钙结合蛋白、细胞外组胺释放蛋白、抗凋亡等。本实验室通过前期研究发现,小菜蛾溴氰菊酯抗性品系与敏感品系相比,抗性品系中翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)的表达水平显著提高,但是TCTP与杀虫剂应激的关系目前尚未见文献报道。为进一步探究其在杀虫剂胁迫及其耐受中的作用,本研究以黒腹果蝇Kc细胞作为模式细胞,采用细胞转染、流式细胞分析、RNAi等实验方法探索TCTP对杀虫剂应激的响应以及TCTP表达量变化对杀虫剂耐受水平的影响。用不同浓度的常用类型杀虫剂分别处理培养的果蝇细胞48h,荧光定量PCR检测细胞中TCTP的表达量,结果表明,在不同杀虫剂处理下,细胞TCTP的表达量均有不同程度的上升,其中溴氰菊酯的影响最明显。因此本研究主要探讨TCTP在溴氰菊酯应激中的响应与功能。选取适宜浓度的溴氰菊酯,分别处理果蝇细胞不同时间,结果发现,在处理24h时TCTP的表达量最高。为进一步证实TCTP在溴氰菊酯应激下对细胞的保护作用,我们克隆TCTP基因并转染果蝇细胞,实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹检测转染效率,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果表明,转染成功的果蝇细胞与对照组细胞相比对溴氰菊酯的抗性有显著的提高;用dsRNA敲低TCTP在果蝇细胞中的表达,结果发现,干扰TCTP的果蝇细胞与对照组相比对溴氰菊酯的抗性降低。上述结果表明:TCTP基因的表达水平与溴氰菊酯的应激反应存在一定的相关性,TCTP的过表达对果蝇细胞应激外界溴氰菊酯胁迫起到一定的保护作用。因此,TCTP可能是与抗性相关的候选基因,但是TCTP在溴氰菊酯抗性中的作用机理尚需进一步研究。

【基金】 国家自然科学基金项目(31071974; 31460482)
  • 【会议录名称】 江苏省遗传学会2017年学术研讨会——“技术创新与遗传学发展”论文摘要集
  • 【会议名称】江苏省遗传学会2017年学术研讨会——“技术创新与遗传学发展”
  • 【会议时间】2017-10-13
  • 【会议地点】中国江苏扬州
  • 【分类号】S482.3;Q78
  • 【主办单位】江苏省遗传学会
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