健脾清化方通过调节Wnt10b通路对糖尿病模型大鼠骨骼肌成肌化影响的研究

【作者】 徐隽斐； 陈清光； 李俊燕； 陶枫； 陆灏； 侯瑞芳； 金昕； 龚凡； 吕璐；

【机构】 上海中医药大学附属曙光医院内分泌科； 中华中医药学会糖尿病分会； 世界中医药联合会内分泌分会； 上海中医药学会糖尿病分会； 上海市中西医结合学会内分泌专业委员会；

【摘要】 目的:观察中药复方健脾清化方通过调节Wnt 10b通路对糖尿病模型大鼠骨骼肌成肌化的影响。方法:小剂量链脲佐菌素联合高脂高糖饲料诱导Wistar大鼠糖尿病模型。随机分为健脾清化方组(JPQ组)、正常组(NOR组)、模型组(CON组)。健脾清化方组以生药含量为1.3g/ml健脾清化方10ml/kg体质量的剂量灌胃,每日一次;正常组和模型组分别给予同体积的蒸馏水灌胃,每日一次,共干预4周。取大鼠骨骼肌组织,分别通过wenstern-blot和Rt-PCR观察健脾清化方对大鼠骨骼肌Wnt1Ob信号通路中Wnt10b、β-catenin基因和蛋白的表达;肌细胞卫星细胞成肌/成脂信号分子Myf5,MyoD,Myogenin,MRF4及成脂信号分子PPARγ2,Adiponectin,C/EBPα的影响。采用葡萄糖氧化酶方法检测大鼠血清葡萄糖,快速血糖仪测定大鼠尾尖血糖;Elisa法测定大鼠血清胰岛素,通过公式计算HOMA-IR指数观察健脾清化方对胰岛素敏感性的影响。结果:研究结果显示健脾清化组Wnt10b蛋白表达下降,其上游调节因子β-catenin的蛋白表达也有相应降低,与CON组比较wnt10b表达明显下降(P<0.01)。健脾清化颗粒组与模型组相比增加成肌因子MyoG的基因表达,下调了成肌因子MYF5、MyoD、MRF4的表达,下调成脂因子PPARγ、Adiponectin的蛋白表达,而对C/EBPca的蛋白表达影响不明显。健脾清化方能有效改善模型大鼠胰岛素敏感性,治疗4周后,JPQ组HOMA-IR指数明显下降(P<0.01)。结论:健脾清化方通过下调Wnt10b的表达,从而增加模型大鼠骨骼肌细胞肌卫星细胞的成肌倾向,降低成脂倾向,并改善胰岛素敏感性。更多还原