中生菌素对茶叶斑病病原——Didymella segeticolavar.camelliae的抑菌活性及形态学研究

【作者】 江仕龙； 李冬雪； 任亚峰； 尹桥秀； 金林红； 宋宝安； 陈卓；

【机构】 贵州大学绿色农药与农业生物工程国家重点实验室培育基地； 贵州大学农学院；

【摘要】 2016年,笔者课题组在贵州省石阡县茶园发现由低温胁迫所致茶叶斑病,经鉴定其病原为Didymella segeticola var.camelliae （同名:Phoma segeticola var.camelliae）。该病害在早春低温阴雨季节的发生面大,对中高海拔茶区的茶树危害程度较重。由于该病缺乏有效、安全的药剂,筛选安全、高效的生物农药品种显得非常重要。本研究采用菌丝生长速率法测定中生菌素对D.segeticola var.camelliae菌株GZSQ-4的抑菌活性,采用光学显微镜、扫描电镜、透射电镜观察药剂作用后菌丝形态变化。结果表明,中生菌素对GZSQ-4具有一定的抑菌活性,其毒力回归方程为y=1.719 5x+3.602 5,R～2=0.98,EC₅₀值为6.50μg/mL。菌株GZSQ-4在2μg/mL、7.5μg/mL和10μg/mL浓度下作用1h、3h和24h,光学显微镜观察发现,随着剂量加大和作用时间延长,菌丝增粗,新生菌丝发育畸形,菌丝末端膨大,菌丝内原生质凝集,气泡增多。通过作用剂量与处理时间相比较发现,药剂处理1h,菌丝形态即有变化。不同剂量处理形态学表明,在药剂作用1h时,2μg/mL的作用的形态变化不明显,7.5μg/mL和10μg/mL的处理已经产生明显变化。扫描电镜观察发现,7.5μg/mL的中生菌素对菌株GZSQ-4新生菌丝发育畸形,表面不光滑,大量皱褶,分支菌丝发育受阻,形成椭圆形或梨球形的典型结构。透射电镜观察发现,在1.5μg/mL的低剂量条件下,中生菌素导致菌丝胞壁变薄,密度降低,菌丝内原生质凝集形成大量颗粒物,并边聚于细胞膜。随着剂量增加至7.5μg/mL和27μg/mL,菌丝内上述超微结构变化更加明显,同时,有大量气泡产生,细胞器边界结构不清晰。更多还原