Rasfonin(A304)引起肾癌细胞的凋亡、自噬和程序性坏死

【作者】 侯卜琳； 车永胜； 姜学军；

【机构】 中国科学院微生物研究所真菌学国家重点实验室； 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所；

【摘要】 按照Clarke形态学分类法,可将细胞程序性死亡(Programmed cell death PCD)分为三种类型,即I型的细胞凋亡、II型的自噬性细胞死亡和III型的程序性死亡(坏死性凋亡)。多年的研究发现,细胞程序性死亡往往不是单独发生的,而是有相互重叠的机制存在。Rasfonin (A304)是从真菌Doratomyces sp.的发酵提取物中分离得到的具有显著肿瘤抑制活性的化合物。之前的研究我们发现,其可以诱导肾癌细胞的自噬和凋亡,而是否能诱导程序性坏死还未见报道。在本研究中,我们利用流式细胞技术、细胞活性测定、电镜、荧光显微镜、免疫杂交、免疫沉淀等手段发现,A304可以引起细胞自噬、凋亡以及程序性坏死,这些现象的发生具有时间和浓度依赖的特点。加入自噬诱导剂后A304能够促进凋亡和坏死的发生;在坏死性凋亡的抑制剂存在的情况下,A304促进caspase依赖的凋亡发生,而降低了细胞坏死;坏死性凋亡的抑制剂necrostatin-1(Nec-1)能明显降低A304引起的细胞活性丢失,并且使A304抑制的自噬发生转换。进一步的研究发现,A304能影响表皮生长因子EGFR的磷酸化以及其下游信号;抑制EGFR的激酶活性可以有效降低A304引起的程序性死亡的发生。这些结果的取得,可以使我们更加明确地认识自噬的调节机制以及更好地了解不同细胞死亡方式的转换机理。更多还原