RAGE通过组蛋白去乙酰化酶1参与调节TDI哮喘气道炎症

【作者】 彭显如； 赵文驱； 黄敏於； 余常辉； 董航明； 蔡绍曦； 赵海金；

【机构】 南方医科大学南方医院呼吸与危重医学科慢性气道疾病实验室；

【摘要】 目的:本课题组前期研究发现晚期糖基化终末产物受体(RAGE)在甲苯二异氰酸脂(TDI)哮喘气道炎症发生中扮演关键角色,但其机制仍未明确。本研究探讨组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)在RAGE调节TDI哮喘小鼠气道炎症中的作用。方法:建立TDI哮喘小鼠模型,实验分5组:对照组、TDI致敏激发组、FPS-ZM1(RAGE抑制剂)处理组、JNJ-26482585(HDAC抑制剂)处理组以及Romidepsin(HDAC抑制剂)处理组。分别采用HE染色及PAS染色评估各组间气道炎症及黏液分泌情况,检测血清总IgE水平,肺泡灌洗液(BALF)细胞分类及淋巴上清Th2因子情况,采用蛋白质印记及免疫组化检测HDAC1表达水平及分布情况。在体外水平配制TDI-人血清白蛋白(TDI-HSA)复合物,刺激人支气管上皮细胞(16HBE)及经慢病毒转染空载体和shRNA-RAGE载体的人支气管上皮细胞,检测各组HDAC1、p-AKT表达情况,使用AKT抑制剂MK2206预处理,蛋白印记检测HDAC1蛋白水平。结果:相比对照组,TDI组气道炎症细胞浸润、粘液分泌明显增加,血清IgE水平、BALF细胞总数(中性粒及嗜酸粒比例)及淋巴上清Th2因子增多,给予FPS-ZM1处理后可以减少上述改变。通过蛋白质印记检测发现,TDI可以明显促进小鼠肺组织HDAC1、p-AKT的表达,并受FPS-ZM1抑制。体外实验发现TDI-HSA(60ug/ml)可以显著增加16HBE细胞HDAC1、p-AKT表达,而敲除RAGE后可以明显抑制TDI-HSA引起的HDAC1、p-AKT表达增高。进一步发现AKT抑制剂MK2206可以抑制TDI-HSA引起的HDAC1的表达增高。结论:RAGE通过影响HDAC1表达参与调节TDI哮喘气道炎症,其机制可能与PI3K/AKT通路有关。更多还原