砷暴露对不同发育阶段仔鼠海马NF-κB水平的影响

【作者】 齐莹莹； 王欢； 耿梦尧； 王艳；

【机构】 沈阳医学院公共卫生学院职业卫生与职业医学教研室；

【摘要】 目的通过研究砷暴露对不同发育阶段子代小鼠海马核转录因子-κB（nuclear transcription factor-κB,NF-κB）水平的影响,探讨砷暴露导致学习与记忆能力损伤的相关分子机制。方法将24只妊娠第1天的SPF级小鼠随机分为对照组、15、30和60 mg·L^-1亚砷酸钠（NaAsO2）染毒组,仔鼠断乳之前经母鼠染砷,断乳至出生后（postnatal day,PND）40天以自行饮水方式进行砷暴露。对PND40子代小鼠进行水迷宫检测,PND10、PND20和PND40仔鼠取脑并分离海马,通过凝胶电迁移率电泳法（EMSA）测定仔鼠海马中NF-κB的核易位水平,采用实时荧光定量RT-PCR（Real-time RT-PCR）法检测仔鼠海马中NF-κB P65mRNA水平,采用Western blot法检测仔鼠海马中p-NF-κB P65蛋白的表达水平。结果水迷宫结果显示,从训练第4天开始,不同浓度砷暴露组仔鼠寻找平台潜伏期均明显长于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）,30和60 mg·L^-1NaAsO₂组仔鼠在撤台后第Ⅱ象限停留时间明显少于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）;EMSA结果显示,各组PND10仔鼠海马NF-κB的核易位水平差异无统计学意义（P>0.05）,60 mg·L^-1NaAsO₂组PND20仔鼠海马NF-κB的核易位水平显著低于对照组和15 mg·L^-1NaAsO₂组,30和60 mg·L^-1NaAsO₂组PND40仔鼠海马NF-κB的核易位水平显著低于对照组和15 mg·L^-1NaAsO2组,差异均具有统计学意义（P<0.05）;Real-time RT-PCR结果显示,各组PND10和PND20仔鼠海马NF-κB P65 mRNA水平差异均无统计学意义（P>0.05）,30和60 mg·L^-1NaAsO2组PND40仔鼠海马NF-κB P65mRNA水平显著低于对照组,差异具有统计学意义（P<0.05）;Western blot结果显示,各组PND 10仔鼠海马p-NF-κB P65蛋白水平差异无统计学意义（P>0.05）,与对照组相比,60 mg·L^-1NaAsO₂组PND 20仔鼠海马p-NF-κB P65蛋白水平明显下降,各砷暴露组PND 40仔鼠海马p-NF-κB P65蛋白水平显著降低,差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论:砷暴露可降低仔鼠海马NF-κB核易位水平和表达水平,从而可能会影响学习与记忆能力。更多还原