白藜芦醇对早期铅暴露老年小鼠脑组织自噬因子的影响

【作者】 胡亚珍； 张丽杰； 王亚伟； 巴月； 张慧珍； 朱静媛； 崔留欣； 黄辉；

【机构】 郑州大学公共卫生学院；

【摘要】 目的通过建立幼年铅暴露动物模型,以AMPK/mTOR作为自噬通路研究起点,探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对铅暴露小鼠脑组织海马区和皮层区自噬因子表达的影响。方法 C57BL/6小鼠断乳后铅暴露3个月,并进行12个月Res隔天灌胃处理,分为对照组(Cont),染铅组(Pb),染铅后Res干预组(PbR)和Res组(CR),其中对照组用羟甲基纤维素钠灌胃。采用Western blotting检测自噬诱导因子(AMPK、mTOR、Rictor、GβL)、自噬体成熟辅助因子(Beclin-1、Atg12、Atg3、Atg7)、自噬降解标志因子(LC3-I/II、p62)的相对表达;Real-time PCR检测AMPK、mTOR、Beclin-1、Atg12、LC3a等基因的mRNA表达水平。结果 1.自噬通路起始关键因子:与Cont相比,海马及皮层组织中Pb组小鼠p-AMPK/AMPK,p-mTOR/mTOR蛋白相对表达量明显减少,而Rictor蛋白相对表达量明显增加,GβL蛋白只在皮层中明显增加。与Pb组相比,海马组织中PbR组P-mTOR/mTOR蛋白相对表达量下调,而皮层中p-AMPK/AMPK蛋白相对表达量增加,Res干预可下调皮层组织Rictor蛋白表达(P<0.001)。与Cont相比,海马及皮层组织中Pb组mTOR mRNA相对表达量减少,而AMPK mRNA相对表达量只在海马组织中明显减少。在皮层组织中,PbR组与Pb组相比,AMPK mRNA相对表达量明显增加。2.自噬体形成相关因子:与Cont相比,海马及皮层组织中Pb组Beclin-1和Atg12蛋白水平明显增加(P<0.001),而Atg7只在海马组织中明显增加(P<0.001);与Pb组相比,PbR组海马及皮层组织中Beclin-1,Atg7表达量减少,而Atg3只在皮层组织中明显减少。海马组织中Beclin-1 mRNA相对表达量Pb组与Cont组相比减少,而在皮层中增加。皮层组织中,PbR组Atg12 mRNA相对表达量较Pb组减少。3.自噬体成熟标志物:与Cont相比,海马及皮层组织Pb组p62蛋白表达明显增加,而LC3II/LC3I相对比只在海马组织中增加(P<0.01)。与Pb组相比,海马及皮层组织PbR组p62蛋白相对表达量明显减少(P<0.001)。与Cont相比,海马组织中Pb组LC3a mRNA相对表达量上调(P<0.05)。当Res干预时,海马及皮层组织中PbR组较Pb组LC3a mRNA相对表达量明显减少(P<0.05)。结论生命早期铅暴露促进老龄小鼠脑组织自噬体成熟、抑制自噬降解能力引起神经元内自噬体滞留。而Res干预可影响铅暴露小鼠脑组织中自噬因子的表达,进而促进神经元自噬降解。更多还原