BmSTAT在家蚕卵中的表达差异研究

【作者】 玉小静； 陈芳艳； 钟杨生； 林健荣；

【机构】 华南农业大学动物科学学院；

【摘要】 【目的】JAK-STAT信号通路是一条由细胞因子刺激的信号转导通路,广泛参与细胞的增殖、分化、凋亡以及免疫调节等许多重要的生物学过程。克隆和分析BmSTAT在蚕卵发育的表达变化,为了解家蚕卵滞育和滞育解除的机理提供参考。【方法】利用荧光定量PCR方法分析BmSTAT基因在932品种所产滞育卵、非滞育卵以及即浸解除滞育卵中的表达情况;应用酵母双杂交的方法检测BmSTAT基因与细胞周期蛋白的互作关系。【结果】根据BmSTAT基因预测核苷酸序列,设计特异引物,克隆得到BmSTAT基因,其开放阅读框有2202bp,可编码733氨基酸。以BmActinA3为内参基因,荧光定量PCR结果表明,非滞育卵产下第1～8d及蚕卵即浸后第2～8d的BmSTAT基因的处于低水平表达,相对表达量在0.1以下,而在滞育卵第1～8d中表达量较高,维持在0.4～5之间。将BmSTAT和CyclinB分别连接到pGBKT7和pGADT7上构建诱饵载体和猎物载体,转化酵母后的混合杂交可观察到三叶草状融合细胞,在筛选培养基上也能获得蓝色菌落。【结论】BmSTAT可以与CyclinB相互作用形成复合体,从而影响家蚕胚胎发育过程中细胞分裂周期进程。更多还原