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基于电穿孔法的快速家蚕基因功能分析技术体系
【作者】 周文林； 上村望； 藤原晴彦； 叶爱红； 曹锦如；
【机构】 浙江省农业科学院蚕桑研究所； 东京大学大学院；
【摘要】 目前基于蚕卵显微注射的转基因技术难度较大,且对基因功能分析的周期较长,耗费更多人力。在家蚕等多数鳞翅目昆虫中,dsRNA不能高效地进入细胞内,单纯地注射dsRNA很难引发RNAi功效。为了克服这些技术上的困难,本研究首先以同时带有EGFP和DsRed2表达框的转基因载体p PIGA3GFP导入2龄幼虫,实现了外源基因自幼虫、蛹直至成虫期全龄表达稳定性,阳性率达到55.88%。进而,利用该技术体系将Wnt1-siRNAs导入家蚕幼虫体内,明显抑制了Wnt1的表达(P<0.01),并阻碍幼虫体表斑纹的形成。结果表明,该技术体系不仅稳定可靠,而且快捷高效。
【基金】 国家蚕桑产业技术体系杭州综合试验站(编号CARS-22-SYZ07);浙江省农业(畜禽)新品种选育重大科技专项子专题(编号:2016C02054-17)
- 【会议录名称】 中国蚕学会第九届青年学术研讨会论文集（摘要汇编）
- 【会议名称】中国蚕学会第九届青年学术研讨会
- 【会议时间】2017-10-26
- 【会议地点】中国重庆
- 【分类号】S881.2
- 【主办单位】中国蚕学会（青年工作委员会）