高选择性磷酸化肽分离富集材料的制备研究

【作者】 陈朗星； 苏捷； 周剑乔； 何锡文； 张玉奎；

【机构】 南开大学化学学院； 中国科学院大连化学物理研究所；

【摘要】 蛋白质的磷酸化作为最主要的蛋白质翻译后修饰形式之一,在生物系统的多项活动中扮演着重要角色,例如信号传递,细胞生长和凋亡以及酶活性^[1],而异常的蛋白质磷酸化与代谢紊乱或其他疾病的发生有密切的关系^[2]。因此,蛋白质磷酸化研究有助于发现一些潜在的疾病生物标志物。目前,对磷酸化蛋白的研究通常是先进行酶解,再通过质谱进行鉴定分析。但是磷酸化肽的本身丰度和电离效率较低,使得它们的质谱信号易被样品中高丰度成分所抑制^[3]。因此,需要在质谱分析之前对磷酸化肽进行选择性富集来提高信号的强度进而获得更好的分析鉴定结果^[4]。迄今为止,许多基于不同机理的策略被开发出来用于选择性捕捉磷酸化肽,例如,免疫亲和法,化学修饰法,金属氧化物亲和色谱法（MOAC）和固定金属离子亲和色谱法（IMAC）^[5]。其中,IMAC法和MOAC法应用最为广泛,两者各有优势,互为补充。本论文工作包括（1）基于IMAC法和MOAC法双功能化磁性金属-有机骨架材料的制备及其对磷酸化肽的富集;（2）设计制备了三种基于固定金属离子亲和色谱法（IMAC）的磷酸化肽富集材料。三种材料对磷酸化肽均表现出良好的富集性能,并成功地用于标准磷酸蛋白酶解液和实际生物样品（脱脂牛奶和人血清）中磷酸化肽的富集。更多还原