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来源于产气肠杆菌Enterobacter aerogenes的NADH氧化酶特性及其在NAD再生中的应用
【机构】 清华大学化学工程系生物化工研究所；
【摘要】 本文在兼性厌氧产氢细菌产气肠杆菌Enterobacter aerogenes IAM1183中检测到NADH氧化酶活性,在该酶作用下,NADH能够直接和氧气反应生成NAD和水。分别研究了在好氧和厌氧培养条件下酶活随培养时间变化的情况,在最佳培养条件下用TEA缓冲液(pH8.0)提取该酶,并经过盐析、离子交换和疏水层析三步纯化,纯化倍数为50倍。经SDS-PAGE验证残余三条带,经过Q-TOF肽段测序鉴定,50kD处条带为NADH氧化酶。该酶在pH 7.5,温度为45摄氏度时具有最佳酶活;但是其在40摄氏度时热失活半衰期仅为37min,在30摄氏度保温1h残余酶活大于90%,因此选择30摄氏度为催化温度。以整细胞催化乙醇生成乙醛为模型体系,研究了该酶在NAD再生中的应用。在批式操作条件下,添加辅酶0.02mM时,辅酶的转化数(TTN)为560,表明该酶确实能够用于辅酶再生,并且具有很强的应用潜力。
- 【会议录名称】 第六届中国酶工程学术研讨会论文摘要集
- 【会议名称】第六届中国酶工程学术研讨会
- 【会议时间】2007-10-21
- 【会议地点】中国云南昆明
- 【分类号】Q936
- 【主办单位】中国微生物学会酶工程专业委员会