Prohibitin1对动脉粥样硬化发生发展及分子机制的探究

【作者】 胡晓艳； 李玫； 崔颖； 赵莹； 高颖；

【机构】 大连医科大学生化教研室； 辽宁省医学细胞分子生物学重点实验室；

【摘要】 动脉粥样硬化(atherosclerosis, AS)是一种复杂的慢性炎症性疾病,是多种心脑血管疾病和周围血管病的重要病理基础,严重威胁人类健康及生命。白细胞介素8(IL-8)是一种趋化因子,来源于单核/巨噬细胞、血管内皮细胞、血管平滑肌细胞,可引起中性粒细胞在炎症部位聚集,诱导血管内皮细胞,平滑肌细胞增殖和迁移。PHB由两个高度相似的亚基组成,即:PHBl和PHB2, Prohibitin1(PHB1)定位于染色体17q21,是由275个氨基酸残基组成分子量为32kd的蛋白,在细胞膜,细胞核,细胞质均有定位。过往的研究表明其在细胞核中与转录因子p53,Rb,E2F,AIF等均存在共定位。这些肿瘤抑制因子或原癌基因与细胞的增殖或凋亡的调控作用密切相关,暗示PHB1功能的多样性。目的:PHB1与炎症及细胞的增殖、凋亡等有关,但与心血管疾病关系的研究资料较少。本研究旨在探讨PHB1对动脉粥样硬化发生发展及分子机制的探究。材料和方法:(1)构建小鼠AS模型,采用组织免疫荧光和免疫组化检测AS斑块中PHB1的表达量,qPCR检测IL-8刺激下人血管平滑肌细胞(AOSMC)、大鼠血管平滑肌细胞(A7r5)、血管内皮细胞(HUVEC)中PHB1的表达情况;(2)MTT检测PHB1对AOSMC和A7r5增殖的影响;(3)transwell检测PHB1对AOSMC和A7r5迁移的影响;(4)流式细胞术方法检测AOSMC、A7r5细胞周期;(5)Elisa检测健康人群和高脂血症人群血清中PHB1的含量。实验结果:(1)PHB1在AS斑块中和IL-8的刺激下,在AOSMC、A7r5和HUVEC表达量明显升高;(2)外源性siPHB1可以明显抑制AOSMC、A7r5的迁移和增殖,而过表达PHB1可以明显促进其增殖。(3)Elisa结果显示,与健康人群相比,高脂血症人群血清中PHB1含量明显增高。结论:(1)IL-8可以诱导AOSMC、A7r5和HUVEC中PHB1的表达,促进AOSMC、A7r5的增殖和迁移,促进HUVEC的增殖(2)外源性siPHB1可抑制AOSMC、A7r5的增殖和迁移,而过表达PHB1可以明显促进其增殖。更多还原