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结核分枝杆菌核糖核酸酶RNase J的结构与功能研究
【机构】 复旦大学;
【摘要】 mRNA的降解是基因转录后表达调控的重要方式之一,细菌能够通过此过程调控基因的表达以快速应对生长条件的变化。RNase J是目前为止发现的唯一一个细菌来源兼具内切及5’→3’外切酶活性的RNase,也是结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, Mtb) mRNA降解复合体的重要组分。研究发现,RNase J基因的敲除会引起枯草杆菌体内30%mRNA的含量发生显著变化,而且突变株对低温及多种抗生素高度敏感。本项目已通过X-ray晶体衍射的方法解析了结核分枝杆菌RNase J单体形式2.6 A分辨率的晶体结构,但在小角散射结果中,RNase J是以二聚体的形式存在。其晶体结构由三个结构域组成,β-lactamase、β-CASP及C末端结构域,活性中心结合两个Zn离子,位于β-lactamase和β-CASP两个结构域的狭缝底部。体外酶活实验显示RNase J还具有青霉素及头孢菌素水解酶的活性(头孢硝噻吩,Km为111±16μm,kcat为0.023±0.00012 min-1)。本项目将基于点突变、体外酶活分析、细菌双杂交和体内基因敲除验证的方法来研究RNase J水解β内酰胺抗生素及参与RNA代谢调控的功能机制,并分析其对分枝杆菌生理的影响。
- 【会议录名称】 中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议摘要集
- 【会议名称】中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议
- 【会议时间】2018-10-25
- 【会议地点】中国重庆
- 【分类号】Q936
- 【主办单位】中国生物化学与分子生物学会(The Chinese Society of Biochemistry and Molecular Biology)