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借助双色荧光报告系统筛选并解析miRNA参与的Kiss1基因表达调控
【机构】 东华大学化学化工与生物工程学院；
【摘要】 下丘脑Kiss1基因通过感应机体的代谢状态,性激素水平等因素调控促性腺激素释放激素GnRH的脉冲式分泌,在哺乳动物的青春期起始调控和生殖功能维持方面发挥重要作用。而Kiss1基因自身表达调控机制还有待进一步解析。microRNAs(miRNAs)是一类重要的基因转录后调控因子,参与众多生命过程的调节。本研究旨在解析由miRNA参与的Kiss1基因表达调控机制。结合青春期前后小鼠下丘脑和GT1-7细胞miRNA表达谱,我们借助双色荧光报告系统对选取的50个保守的miRNA家族的成员代表进行筛选。经过初步筛选我们发现:3个miR-25 family的成员通过结合Kiss1 3’UTR直接抑制其表达;miR-181b-5p,miR-199b-3p和miR-320-3p则可能通过相应靶基因间接调控Kiss1基因表达。结合这些miRNAs表达的时空特异性特征,我们对其中2个高水平表达miR-25 family成员(miR-25-3p和miR-92a-3p)和miR-199b-3p进行进一步验证。研究结果显示,敲低GT1-7细胞miR-25-3p和miR-92a-3p水平促进Kiss1基因表达;miR-199b-3p的过表达降低了细胞中MAPK pathway的活性从而抑制Kiss1的表达。总之,我们的研究初步揭示了由miRNA参与的Kiss1表达调控机制,也首次发现MAPK pathway对Kiss1基因表达的影响。
【关键词】 Kiss1基因；
microRNAs；
双色荧光报告系统；
miR-25 family；
miR-199b-3p；
- 【会议录名称】 中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议摘要集
- 【会议名称】中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议
- 【会议时间】2018-10-25
- 【会议地点】中国重庆
- 【分类号】Q78
- 【主办单位】中国生物化学与分子生物学会（The Chinese Society of Biochemistry and Molecular Biology）