CD59-RNAi对急性T系白血病Jurkat细胞凋亡相关分子的作用研究

【作者】 高美华；

【机构】 青岛大学医学院；

【摘要】 目的 :探讨CD59RNAi对急性T系白血病Jurkat细胞凋亡相关分子的影响。方法 :运用RNAi慢病毒为载体下调急性T系白血病Jurkat细胞株CD59的表达;激光共聚焦观察转染效率及CD59分子的定位;RT-PCR、Western blot筛选下调效果最佳细胞进行后续的分子生物学实验; Western blot检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、Survivin蛋白表达量的变化; ELISA检测各组的细胞培养上清中IL-3、TNF-a的表达。结果 :激光共聚焦观察到转染各组的转染效率在90%以上,CD59分子主要位于细胞膜; RT-PCR筛选得出干扰A组的转染效果最佳; Western blot结果显示干扰A组的CD59蛋白的表达量降低最显著,故将RNAi CD59A作为实验组;实验组Bax、Caspase-3调亡相关蛋白的表达增强(P<0.05),增殖相值险关蛋白Bcl-2、Survivin的表达被抑制(P<0 05);ELISA结果显示干扰组IL-3表达水平降低(P<0 05), TNFa的表达水平升高(P<0 05)。结论 :D59RNAI可沉默CD59基因,促进急性T系白血病Jurkat细胞凋亡相关分子表达,从而促进白血病细胞凋亡。更多还原