VEGF-VEGFR2信号轴通过FAK/PI3K/AKT和p38MAPK通路调控人牙髓干细胞的迁移能力

【作者】 孙雪飞； 孟柳燕； 边专；

【机构】 武汉大学口腔医学院；

【摘要】 目的:研究人牙髓组织炎症状态下VEGF的表达变化,检测VEGF对人牙髓干细胞迁移能力的影响,探索VEGF对人牙髓干细胞迁移能力调控的机制。材料方法:收集正常和牙髓炎状态牙齿,检测牙髓组织中VEGF的表达;分离培养人牙髓干细胞,挑选细胞单克隆进行纯化培养,使用0、0.01、0.1、1、10、ug/ml浓度的LPS刺激牙髓干细胞,qRCP检测牙髓干细胞VEGF mRNA水平的表达改变;使用0、1、10、20、50、100ng/ml浓度的VEGF刺激牙髓干细胞,细胞划痕实验及Transwell小室实验检测细胞迁移能力,Western blot检测FAK、AKT、p38蛋白磷酸化水平的表达,分别使用VGEFR2阻断剂、FAK阻断剂、AKT阻断剂、p38阻断剂和VEGF共同刺激牙髓干细胞,划痕实验及Transwell小室实验检测细胞迁移能力的改变,Westernblot检测FAK、AKT、p38蛋白磷酸化水平的表达。结果:炎症牙髓组织中VEGF的表达水平显著上调,LPS刺激牙髓干细胞24h后可明显促进VEGFm RNA的表达;10-100ng/ml的VEGF可明显促进人牙髓干细胞的迁移能力,1-100ng/ml的VEGF均可激活FAK、AKT、p38磷酸化蛋白的表达,并具有时间和浓度依赖性;而VEGFR2阻断剂和FAK、AKT、p38阻断剂均可逆转VEGF对人牙髓干细胞迁移能力的促进作用。结论:VEGF-VEGFR2信号轴通过FAK/PI3K/AKT和p38MAPK通路调控人牙髓干细胞的迁移能力,提示VEGF在hDPSCs损伤修复过程中发挥着重要作用。更多还原