山奈酚激活内质网应激途径,通过CHOP-自噬信号通路诱导HepG2细胞凋亡

【作者】 郭海清； 林伟； 张向颖； 胡中杰； 段钟平； 张晶； 任锋；

【机构】 首都医科大学附属北京佑安医院； 北京市肝病研究所；

【摘要】 背景与目的山奈酚是一种黄酮类化合物,因其抗肿瘤作用引起广泛关注,但其潜在的作用机制尚未完全阐明。本研究主要探索山奈酚对人肝癌细胞系Hep G2细胞自噬及凋亡的影响及其作用机制。材料与方法以不同浓度的山奈酚孵育HepG2细胞,在不同时间采用蛋白质印迹法检测细胞自噬途径关键蛋白Atg5,Atg 7,Beclin1及LC3的表达水平。分别通过3-甲基腺嘌呤(3-MA)干预/Atg 7小干扰RNA(siRNA)转染抑制自噬通路,通过4-苯基丁酸(4-PBA)干预/CHOP siRNA转染抑制内质网应激(ERS)途径,或通过CHOP过表达质粒转染促进ERS后,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,蛋白质印迹法检测细胞自噬与凋亡途径关键蛋白的表达水平。结果山奈酚对Hep G2细胞的自噬诱导作用呈现剂量和时间依赖性。抑制Hep G2细胞自噬途径,山奈酚对Hep G2细胞的凋亡诱导作用随之减弱,另一方面,抑制Hep G2细胞内质网应激途径,山奈酚诱导的Hep G2细胞自噬作用也随之减弱,此外,增强ESR能够逆转4-PBA对山奈酚诱导的Hep G2细胞自噬的抑制作用。结论我们前期研究结果表现,山奈酚能够通过ERS途径诱导Hep G2细胞凋亡,基于我们之前的研究,可得出如下结论:山奈酚激活内质网应激途径,通过CHOP-自噬信号通路诱导Hep G2细胞凋亡。本研究结果表明,山奈酚具有潜在的抗肝癌作用活性。更多还原